Naslov
Identifikacija kinaze odgovorne za fosforilaciju mitohondrijskog proteina NIX
(Identification of the kinase responsible for phosphorylation of NIX mitochondrial protein)

Autori
Lara Šamadan

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet u Zagrebu

Mjesto
ZAgreb

Datum
10.12

Godina
2018

Stranica
61

Mentor
Novak, Ivana

Ključne riječi
autofagija, mitofagija, NIX, fosforilacija, kinaza, GSK3b, IKKb
(autophagy, mitophagy, NIX, phosphorylation, kinase, GSK3b, IKKb)

Sažetak
Dosadašnja istraživanja ukazuju kako fosforilacija uvelike pospješuje vezanje mitohondrijskog proteina NIX za autofagosomalne receptore mitofagije LC3A i LC3B prilikom regrutiranja autofagosoma. Cilj ovog istraživanja je identificirati kinazu odgovornu za fosforilaciju proteina NIX što bi moglo dodatno razjasniti mehanizam regulacije mitofagije. In silico analizom odabrane su kinaze IKKβ i GSK3β koje su testirane metodom Pull-down i imunoprecipitacijom na interakciju s fuzijskim proteinom EGFP-NIX i njegovim mutantama. Western blot imunodetekcijom provjerena je proteinska interakcija mitohondrijskog proteina NIX i dviju odabranih potencijalnih kinaza. Rezultati pokazuju interakciju proteina NIX s kinazom GSK3β, dok interakcija s kinazom IKKβ izostaje te se iz rezultata zaključuje kako je mitohondrijski protein NIX u interakciji s kinazom GSK3β. S obzirom na ustanovljenu interakciju s kinazom GSK3β, ciljnom mutagenezom in vitro napravljene su dvije mutante, jedna s konstitutivno aktivnom kinazom GSK3β te druga čija je kinazna domena inaktivna. Buduća istraživanja s navedenim konstruktima trebala bi pokazati fiziološku važnost ove interakcije.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA