Naslov
Funkcija i unutarstanična lokalizacija proteina ICP34.5 herpes simpleks virusa 1
(Function and intercellular localization of herpes simplex virus 1 ICP34.5 protein)

Autori
Duvnjak, Lara

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Odjel za Biotehnologiju

Mjesto
Rijeka

Datum
21.09

Godina
2018

Stranica
28

Mentor
Doc. dr. sc. Igor Jurak

Ključne riječi
Herpes simpleks virus, HSV-1, ICP34, 5
(Herpes simplex virus, HSV-1, ICP34, 5)

Sažetak
Herpes simpleks virus tipa 1 jedan je od najraširenijih virusa kod ljudi. Uzrokuje trajnu infekciju, a razlikujemo litičku i latentnu fazu infekcije. Latentnu fazu karakterizira mirovanje virusa u neuronima, nakon čega kao posljedica stresa ili smanjenog imunog statusa domaćina, virus može preći u litičku fazu replikacije u epitelnim stanicama. HSV-1 virus je razvio mnoge mehanizme pomoću kojih suprimira obrambene odgovore domaćina te omogućava efikasnu virusnu replikaciju. Jedan od vrlo važnih proteina uključenih u modulaciju staničnog odgovora je ICP34.5 koji je i centralni protein ovog istraživanja. ICP34.5 je multifunkcionalni protein i važan faktor neurovirulencije u ljudi. Ulazi u interakciju s mnogim staničnim proteinima kao što su NOP53, PP1, PKR. Svrha ovog istraživanja je eksperimentalno utvrđivanje lokalizacije ovog proteina te povezivanje s već poznatim funkcijama. Plazmid pcDNA 3xFLAG 34.5 korišten je za transfekciju virusnog gena, a sastoji se od gena za FLAG biljega, virusnog gena γ34.5 te promotora iz citomegalovirusa. pcDNA 3xFLAG 34.5 je transfeciran u humane epitelne stanice retine (RPE-1). Lokalizacija proteina je određena pomoću fluorescentne mikroskopije. Dobiveni Herpes simpleks virus tipa 1 jedan je od najraširenijih virusa kod ljudi. Uzrokuje trajnu infekciju, a razlikujemo litičku i latentnu fazu infekcije. Latentnu fazu karakterizira mirovanje virusa u neuronima, nakon čega kao posljedica stresa ili smanjenog imunog statusa domaćina, virus može preći u litičku fazu replikacije u epitelnim stanicama. Virus HSV-1 je razvio mnoge mehanizme pomoću kojih suprimira obrambene odgovore domaćina te omogućava efikasnu virusnu replikaciju. Jedan od vrlo važnih proteina uključenih u modulaciju staničnog odgovora je ICP34.5 koji je i centralni protein ovog istraživanja. ICP34.5 je multifunkcionalni protein i važan faktor neurovirulencije u ljudi. Ulazi u interakciju s mnogim staničnim proteinima kao što su NOP53, PP1, PKR koji predstavljaju važne faktore u obrani stanice od unutarstaničnih mikroorganizama kao što je HSV-1. Svrha ovog istraživanja je eksperimentalno utvrđivanje lokalizacije ovog proteina te povezivanje s već poznatim funkcijama. Plazmid pcDNA 3xFLAG 34.5 korišten je za transfekciju stanica. pcDNA 3xFLAG 34.5 je transfeciran u humane epitelne stanice retine (RPE-1). Lokalizacija proteina je određena pomoću fluorescentne mikroskopije. Dobiveni rezultati pokazuju da je ICP34, 5 ponajviše eksprimiran unutar jezgre stanica što može govoriti o važnosti njegovih funkcija u jezgri, dok je u manjoj mjeri eksprimiran i u citoplazmi stanica. Osim toga, utvrdili smo da količina plazmida kojim su transfecirane ciljne stanice može imati znatan utjecaj na interpretaciju lokalizacije eksprimiranog proteina u stanicama.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Interdisciplinarne prirodne znanosti

POVEZANOST RADA