Naslov
Uloga tumorske angiogeneze i izražaja proteina i amplifikacije gena EGFR i HER-2 u nesitnostaničnom raku pluća
(The role of tumor angiogenesis and expression of proteins and amplification of EGFR and HER-2 gene in non-small cell lung cancer)

Autori
Bačić, Ivan

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Medicinski fakultet Rijeka

Mjesto
Rijeka

Datum
06.07

Godina
2012

Stranica
100

Mentor
Prof.dr.sc. Elvira Mustać, dr.med.

Ključne riječi
nesitnostanični rak pluća ; angiogeneza ; MVD ; VEGF-A EGFR ; FISH ; HER-2 ; imunohistokemija ; tkivni mikroarej ; preživljenje
(non-small cell lung cancer ; angiogenesis ; MVD ; VEGF-A ; EGFR ; FISH ; HER-2 ; immunohistochemistry ; tissue microarrays ; survival)

Sažetak
CILJ: Tumorska angiogeneza je prognostički čimbenik preživljenja bolesnika koji boluju od nesitnostaničnog raka pluća. Međutim, u literaturi nedostaje radova koji se odnose na procjenu angiogeneze u primarnim tumorima i metastatski promijenjenim limfnim čvorovima sredoprsja te njezinog utjecaja na preživljenje bolesnika s nesitnostaničnim rakom pluća. Cilj je ove studije izvršiti procjenu tumorske angiogeneze određivanjem srednje gustoće krvnih žila (MVD), imunohistokemijski utvrditi ekspresiju vaskularnog endotelnog čimbenika rasta (VEGF-A) i receptora iz obitelji receptora epidermalnog čimbenika rasta (EGFR i HER-2) na tumorskim stanicama, proteinsku ekspresiju VEGF-A, EGFR i HER-2 usporediti s gustoćom krvnih žila ; proteinsku ekspresiju EGFR i HER-2 usporediti s genskom amplifikacijom utvrđenom FISH analizom, a potom utvrditi značaj svih navedenih parametera u kontekstu patohistoloških karakteristika raka i kliničkih osobina bolesnika odnosno utjecaj na preživljenje bolesnika s nesitnostaničnim rakom pluća. MATERIJALI I METODE: Ukupno je ispitano 90 uzoraka nesitnostaničnog raka pluća ; 30 uzoraka primarnih tumora bolesnika koji su imali metastaze u limfnim čvorovima sredoprsja, 30 uzoraka metastatski promijenjenih limfnih čvorova i 30 uzoraka tumora bolesnika bez metastaza. Nakon izrade tkivnih mikroareja (TMA, tissue microarray) pristupilo se imunohistokemijskom bojanju tkiva na EGFR, HER-2 i VEGF-A. Imunohistokemijska markacija CD31 (PECAM-1 ; platelet/endothelial cell adhesion molecule) izvršena je korištenjem monoklonalnog anti-CD31 antitijela te se na taj način izvršila procjena gustoće tumorskih krvnih žila ( engl. microvessel density, MVD). Evaluacija statusa gena HER-2 i EGFR rađena je FISH metodom koristeći Vysis probe (Downers Grove, IL, SAD). Podatci o preživljenju prikupljeni su iz Registra za rak Hrvatskog zavoda za javno zdravstvo. REZULTATI: Ukupno dvogodišnje preživljenje ispitivanih bolesnika bilo je 59%. Uočena je statistički značajna razlika u preživljenju bolesnika sa metastazama u limfnim čvorovima sredoprsja i bolesnika bez metastaza ( 47% u odnosu na 73%). Prosječno dvogodišnje preživljenje svih ispitivanih bolesnika koji su imali visoki MVD je bilo 45% dok je preživljenje bolesnika sa niskim MVD bilo 69%. Ova razlika u preživljenju je statistički značajna (p=0, 02). U skupini bolesnika bez metastaza njih 15 (50%) imalo je visoko vaskularizirane tumore (visoki MVD), a 15 bolesnika je imalo tumore sa niskim MVD. Razlika u preživljenju u odnosu na MVD u ovoj grupi bolesnika nije statistički značajna. U grupi bolesnika s metastazama njih 13 (43%) imalo je niski MVD, a 17 bolesnika imalo je visoki MVD. Razlika u preživljenju u ovoj grupi bolesnika je statistički značajna: dvogodišnje preživljenje bolesnika s visokim MVD u primarnim tumorima bilo je 23%, a bolesnika s niskim MVD u primarnim tumorima 74% što čini statistički značajnu razliku preživljenja ( p=0, 01). Uočena je visoka korelacija MVD u primarnim tumorima i metastatski promijenjenim limfnim čvorovima (r=0, 57) što može imati značajna kliničke implikacije. Uočena je umjereno snažna i snažna ekspresija VEGF-A ( više od 50% tumorskih stanica) u tumorima svih ispitivanih bolesnika-83%. Ovakva VEGF-A ekspresija korelira s MVD u metastatski promijenjenim limfnim čvorovima. Korelacija VEGF-A s MVD u primarnom tumoru uočena je tek kod snažne ekspresije VEGF-A (više od 75% pozitivnih tumorskih stanica) na granici statističke značajnosti (p=0, 064). Nije uočena korelacija izražaja VEGF-A s MVD tumora bolesnika bez metastaza. Nije uočena povezanost ekspresije VEGF-A s preživljenjem bolesnika. Ukupna ekspresija EGFR kao i ekspresija EGFR po grupama bolesnika bila je 20%. Nije uočena statistički značajna korelacija ekspresije EGFR sa kliničkopatološkim osobinama bolesnika, preživljenjem niti MVD. Nije uočena niti korelacija ekspresije EGFR u primarnom tumoru i metastazama. Ukupna ekspresija HER-2 bila je 13%, u grupi bolesnika s metastazama 20% dok je u grupi bolesnike bez metastaza bila 10% što nije statistički značajna razlika. Nije bilo korelacije ekspresije HER-2 s kliničkopatološkim osobinama bolesnika, preživljenjem niti MVD. FISH analizom otkrivena je amplifikacija HER-2 gena u 3 tumora (5%), dok se amplifikacija EGFR gena nije uočena (0%). ZAKLJUČAK: Univarijantna analiza pokazala je da bolesnici s visokim MVD imaju statistički značajno lošije preživljenje u odnosu na bolesnike s niskim MVD, dok je multivarijantna analiza pokazala da MVD ima neovisni prognostički značaj u ukupnom broju ispitivanih bolesnika i u grupi bolesnika s metastazama. Dobiveni rezultati ukazuju da dobro vaskularizirani tumori imaju agresivniji klinički tijek i posljedično lošije preživljenje te da su bolesnici s takvim tumorima kandidati za agresivno liječenje neovisno o kliničkom stadiju bolesti.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kliničke medicinske znanosti

POVEZANOST RADA