Naslov
Određivanje kvalitete DNA goveda iz različitih tkiva
(Determination of DNA quality of cattle from different tissues)

Autori
Duvnjak, Ivana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, preddiplomski

Fakultet
Agronomski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
02.07

Godina
2015

Stranica
38

Mentor
Čubrić Čurik, Vlatka

Ključne riječi
DNA goveda, ekstrakcija, nanofotometar, elektroforeza, lančana reakcija polimerazom
(DNA bovine, extraction, nanofotometer, electrophoresis, polymerase chain reaction)

Sažetak
Kvalitetna DNA je osnovni preduvjet za kvalitetnu analizu animalnom genoma. Da bismo ju mogli analizirati, potrebno ju je izdvojiti iz različitih tkiva postupkom ekstrakcije Cilj ovog rada bio je ekstrahirati DNA goveda iz različitih materijala (tkiva, krvi, dlake), provjeriti dobivenu DNA kvantitativno i kvalitativno te utvrditi pogodnost dobivene DNA za daljnje analize probnim PCR-om. Također, cilj je prema dobivenim rezultatima dati preporuku za uzimanje uzoraka koji daju najbolje rezultate, a ujedno su i najbolji za životinju. Ekstrahirana je DNA iz ukupno 137 uzoraka, i to 71 iz uzoraka krvi, 55 iz uzoraka dlake, pet iz uzoraka tkiva (uha) te šest iz uzoraka dlake i tkiva. Uspješnost ekstrakcije je provjerena kvantitativno spektrofotometrijskim mjerenjem koncentracije i kvalitativno vodoravno gel elektroforezom na agaroznom gelu. Najbolji rezultati dobiveni su ekstrakcijom DNA iz krvi. Takva DNA imala je dobre koncentracije, čistoću i dobru vizualizaciju na gel elektroforezi. Rezultati dobiveni ekstrakcijom DNA iz tkiva su, također dobri, međutim, prilikom uzimanja uzoraka tkiva upitna je dobrobit životinje. Dlaka se pokazala kao najlošiji materijal za ekstrakciju DNA, budući da su rezultati pokazali najniži stupanj čistoće i razgrađenost genetskog materijala. Potvrda kvalitete DNA ekstrahirane iz krvi dobivena je pozitivnim rezultatom probnog PCR-a, a ujedno je i optimiziran protokol koji će se koristiti za ostale uzorke.

Izvorni jezik
Hrvatski

POVEZANOST RADA