Naslov
Validacija Endosafe PTS sustava i razvoj postupka testiranja kulture keratinocita i limbalnih stanica na endotoksine
(Validation of Endosafe PTS system and practical approach for endotoxin testing of keratinocytes and limbal stem cells)

Autori
Blažević, Valentina

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Prehrambeno-biotehnološki fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
25.07

Godina
2017

Stranica
68

Mentor
Gaurina Srček, Višnja

Neposredni voditelj
Tominac Trcin, Mirna

Ključne riječi
endotoksini, limbalne stanice, keratinociti, Endosafe PTS, validacija
(endotoxins, limbal cells, keratinocytes, Endosafe PTS, validation)

Sažetak
Stanična terapija keratinocitima i limbalnim stanicama pripada ATMP proizvodima koji se koriste za kliničku primjenu, stoga je potrebno osigurati visoku razinu sigurnosti i kvalitete. Endotoksini su komponente stanične stijenke gram-negativnih bakterija, kod pacijenta mogu izazvati septički šok i smrt. Proizvodi stanične terapije imaju potencijal za uvođenje endotoksina izravno u krv. Svrha ovog rada bila je razvoj postupka testiranja stanične kulture keratinocita i limbalnih stanica na prisutnost endotoksina putem komercijalnog Endosafe PTS sustava koji se temelji na LAL metodi. Prilikom provođenja testiranja na endotoksine razvijen je izračun putem kojeg je moguće definirati prihvatljive vrijednosti koncentracije endotoksina u proizvodu u skladu s smjernicama FDA, Europske farmakopeje 2.6.14. i ISO standardima. Endosafe PTS sustav uspješno je validiran za testiranje otpadnog medija kulture stanica na prisutnost endotoksina unutar kratkog vremenskog roka. Prilikom testiranja javile su se interferencije uzorka s LAL reagensom koje su uspješno prevladane razrjeđivanjem uzorka do MVD vrijednosti koja je određena za svakog pojedinog pacijenta. Nadalje, endotoksini snažno adheriraju na staklenu površinu, te uklanjanje endotoksina predstavlja kritičnu točku prilikom pohrane GM medija. GM medij testiran je na endotoksine tijekom 24 h i 11 dana, u staklenim bocama nije zabilježeno povećanje koncentracije endotoksina.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biotehnologija

POVEZANOST RADA