Naslov
Separacija bioloških makromolekula na monolitnim kromatografskim medijima
(Separation of biological macromolecules on monolithic chromatographic media)

Autori
Branović, Karmen

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
03.12

Godina
2001

Stranica
123

Mentor
Benko, Bojan ; Josić, Đuro

Ključne riječi
monoliti, kromatografija, koagulacijski faktor IX, vitronektin, imunoglobulinG
(monoliths, chromatography, factor IX, vitronectin, immunoglobulin G)

Sažetak
Monoliti predstavljaju novu generaciju stacionarne faze u tekućinskoj kromatografiji. Zbog specifičnih hidrodinamskih svojstava, monoliti omogućavaju separacije makromolekula koje su za nekoliko redova veličine brže od standardnih, konvencionalnih gelova. U ovom radu pokazana je uspješna primjena monolita za separaciju proteina iz biološki komplicirane smjese kao što je plazma. Kao modelni proteini koristili su se koagulacijski faktor IX i imunoglobulin G. Separacija faktora IX i vitronektina (prateći protein plazme u komercijalnom preparatu faktora IX) provedena je na analitičkom i preparativnom nivou. Pri tome je specifična aktivnost faktora IX povećana više od 4 puta u odnosu na konvencionalne nosače. Separacija imunoglobulina G od pratećih proteina-albumina i transferina, provedena je na analitičkom nivou. Za tu separaciju razvijena je nova metoda procesne provjere imunoglobulinskog preparata tzv. sekvencijalna kromatografija. Sekvencionalna kromatografija sastoji se od afinitetne kromatografije i ionske izmjene izvedenih neposredno jedna iza druge jer se u isto kućište stavi afinitetni CIM Protein G disk (monolit) i anionski izmjenjivač CIM QA disk (monolit). Mijenjanjem uvjeta separacije moguće je u jednom koraku za samo 5 minuta odvojiti sva tri proteina i pri tome kvantificirati količinu transferina i albumina.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kemija, Temeljne medicinske znanosti

POVEZANOST RADA