Naslov
Homologna rekombinacija između plazmida i kvašćevog gena koji sadrži heterolognu inserciju
(Homologous recombination between plasmid and yeast gene interrupted by heterologous insertion)

Autori
Mitrikeski, Petar Tomev

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, magistarski rad

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
20.03

Godina
2001

Stranica
98

Mentor
Zgaga, Zoran

Ključne riječi
kvasac Saccharomyces cerevisiae; homologna rekombinacija; gensko ciljanje; heterologna insercija; položaj dvolančanog loma
(yeast Saccharomyces cerevisiae; homologous recombination; gene targeting; heterologous insertion; double-strand break position)

Sažetak
U ovom istraživanju analizirana je homologna rekombinacija između plazmidne molekule i kvašćeva kromosoma pri čemu je ciljna homologija (gen ura3) sadržavala heterolognu inserciju (gen ARG4) u obje orijentacije. Uvođenjem dvolančanih lomova u plazmidnu DNA pomoću različitih restrikcijskih enzima, inicijacija rekombinacije usmjeravana je u uzvodni ili nizvodni dio prekinute homologije. Analizom transformanata ustanovljeno je da prototrofi, osim usmjerenom plazmidnom ugradnjom, mogu nastati i konverzijom insercije te ugradnjom plazmida u susjednu homologiju. Ovakvi događaji bili su oko sedam puta učestaliji kada je do inicijacije rekombinacije dolazilo u uzvodnom dijelu alela ura3::ARG4. Zapažene razlike mogle bi se objasniti utjecajem transkripcije na proces homologne rekombinacije, a predložen je i model kojim se mogu objasniti opaženi genetički događaji. Također, ustanovljeno je da učinkovitost transformacije lineariziranim plazmidom znatno ovisi o položaju dvolančanog loma unutar homologije.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA