Naslov
Pojedinačni i kombinirani učinci mikotoksina i ekstrakata nekih Aspergillus vrsta plijesni u ljudskim staničnim linijama
(Single and combined effects of mycotoxins and extracts of Aspergillus species in human cell lines)

Autori
Jakšić Despot, Daniela

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Farmaceutsko-biokemijski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
11.11

Godina
2016

Stranica
218

Mentor
Šegvić Klarić, Maja

Ključne riječi
CaM, kromatografija, spektrometrija, ELISA, p53, inhalacija mikotoksina, A549 , THP-1 makrofagi, citokini, citotoksičnost, Kometni test, kombinacije mikotoksina, inhalacijska izloženost, nekovalentne DNA interakcije
(Indoor airborne Aspergilli, Aspergillus section Flavi, section Versicolores, section Nigri, fumonisin B1, fumonisin B2, aflatoxin B1, sterigmatocystin, molecular detection, CaM, chromatography, spectrophotometry, ELISA, p53, inhalation of mycotoxins, A549 , THP-1 macrophages, cytokines, cytotoxicity, Comet assay, combinative effects, inhalation exposure, non-covalent DNA interactions)

Sažetak
Vrste aspergila učestale su u zraku radnog i stambenog okolišu. U povećanim koncentracijama, ali i zbog izraženog potencijala tvorbe mikotoksina, pridonose kroničnim bolestima dišnog sustava. Izolati aspergila sekcija Flavi, Versicolores i Nigri, prikupljeni tijekom jednogodišnjeg uzorkovanja na lokacijama mlin žitarica (M) te u stambenim prostorima (podrum-P, stan-S) identificirani su do razine vrste primjenom makro- i mikroskopskih obilježja te analizom genskog slijeda CaM. Ukupne koncentracije plijesni u zraku na lokaciji M bile su do 30 puta više u odnosu na ostale lokacije, a dosezale su 40000 CFU/m3. Kao najčešće vrste u M identificirane su A. flavus u sekciji Flavi koja se uz A. parasiticus pokazala potentnim proizvođačem B i G skupina aflatoksina, na što upućuje detekcija analita u mikroekstraktima te detekcija gena aflR, norA i omtA uključenih u biosintezu aflatoksina. Na lokacijama P i S dominirale su vrste A. jensenii i A. creber unutar sekcije Versicolores, a vrste A. tubingensis i A. welwitschiae unutar crnih aspergila izoliranih na svim lokacijama tijekom cijele godine. Pored sedam identificiranih vrsta među izolatima iz sekcije Versicolores izolirana je i jedna nova vrsta a sve vrste pokazale su se dobrim proizvođačima STC koji je detektiran u njihovim ekstraktima, dok je od gena uključenih u biosintezu STC detektiran gen norA. Od pet identificiranih vrsta unutar sekcije Nigri, samo A. niger i A. welwitschiae proizvode FB2 što je potvrđeno na razini gena fum1 i fum8, a FB2 je dokazan u ekstraktima kultura. In vitro ispitivanjima toksičnosti, A549 stanice i THP-1 makrofagi bili su izražene osjetljivosti na djelovanje STC te ekstrakata vrsta proizvođača STC. Citotoksični učinci kombinacija mikotoksina AFB1+FB1/FB2 te STC+ FB1/FB2 uglavnom su se antagonizirali. Međutim, izlučivanje IL-6 u THP-1 makrofagima koreliralo je s koncentracijom AFB1 i STC čak i nakon dodatka FB1/FB2. Aditivni ili sinergistički učinci mikotoksinogenih ekstrakata vrsta sekcija Flavi+Nigri te Versicolores+Nigri odrazili su se i na izlučivanje citokina, među kojima dominantno TNF-α. Genotoksičnost AFB1 i STC u A549 stanicama korelirala je s povećanom ekspresijom p53 proteina sa i bez dodatka FB1 ili FB2. Ispitivanja interakcija s DNA i polinukleotidima u vodenom mediju ukazala su na snažno nekovalentno vezanje STC, bitno različitim mehanizmima od AFB1.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Javno zdravstvo i zdravstvena zaštita, Farmacija

POVEZANOST RADA