Naslov
Uvođenje mutacije u gen SCW4 iz kvasca Saccharomyces cerevisiae pomoću PCR metode
(Introducing mutation in Saccharomyces cerevisiae gene SCW4 using PCR method)

Autori
Vučenović, Ivan

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, preddiplomski

Fakultet
Prehrambeno-biotehnološki fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
20.09

Godina
2016

Stranica
34

Mentor
Teparić, Renata

Ključne riječi
PCR; Saccharomyces cerevisiae; uvođenje mutacije; SCW4
(PCR; S. cerevisiae; mutation; SCW4)

Sažetak
PCR (lančana reakcija polimeraze) je metoda koja omogućava selektivno, brzo i osjetljivo umnažanje željenog slijeda nukleotida DNA. Kroz tri stupnja reakcije dobije se kao produkt željena sekvenca DNA u velikom broju kopija. U ovom radu je PCR korišten za uvođenje mutacija u gen SCW4 kvasca Saccharomyces cerevisiae na način da su konstruirana dva fragmenta od kojih je jedan sadržavao sekvence uzvodno, a drugi nizvodno od mjesta mutacije. Mutacija se odnosila na deleciju dijela gena koji kodira za 126 aminokiseline na N-terminalnom kraju proteina Scw4. Dobiveni fragmenti su zatim drugim krugom PCR-a spojeni u jedan konstrukt budući da su međusobno komplementarni u dijelu gena neposredno uzvodno i nizvodno od deletiranog dijela u nativnom genu. Dobiveni konstrukt je zatim TA-ligacijom unesen u plazmid kojim je transformirana bakterija E. coli u kojoj je umnožen i iz koje je uspješno izoliran.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biotehnologija

POVEZANOST RADA