Naslov
Razvoj in vitro modela rane prikladnog za procjenu učinka nanosustava kitozana i melatonina na migraciju i proliferaciju fibroblasta
(Development kof in vitro wound healing model suitable for evaluation of the effect of nanosystems of chitosan and melatonin on the migration and proliferation of fibroblasts)

Autori
Blažević, Filip

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Farmaceutsko-biokemijski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
04.12

Godina
2015

Stranica
56

Mentor
Hafner, Anita

Ključne riječi
Kitozan; Melatonin; Lecitin; Nanočestice; cijeljenje rane in vitro; fibroblasti
(Chitosan; Melatonin; Lecithin; Nanoparticles; wound healing in vitro)

Sažetak
Cijeljenje rane je kompleksan proces koji uključuje interakcije različitih tipova stanica, izvanstaničnog matriksa i različitih faktora rasta. U procesu cijeljenja rane važnu ulogu imaju fibroblasti koji tijekom inflamatorne faze kemotaksijom migriraju u područje rane gdje sintetiziraju i kasnije remodeliraju novi izvanstanični matriks. S razvojem terapijskih sustava s potencijalnim učinkom na cijeljenje rane, raste i potreba za razvijanjem in vitro modela rane koji mogu poslužiti kao zamjena za in vivo modele pri procjeni potencijala razvijenih sustava. In vitro modeli omogućuju jeftino i brzo probiranje tvari, materijala i terapijskih sustava koji bi se mogli potencijalno koristiti u daljnjim ispitivanjima. Time se smanjuje broj ispitivanja provedenih u laboratorijskih životinja. Cilj ovog rada bio je ispitati mogućnost korištenja MJ90 fibroblasta kože u pripravi in vitro modela rane koji bi omogućio procjenu učinka lecitinsko-kitozanskih nanočestica s melatoninom na proliferaciju i migraciju fibroblasta in vitro. Razvoj diskriminatornog modela omogućio bi probir formulacija s najvećim potencijalnim učinkom na cijeljenje rane. Lecitinsko-kitozanske nanočestice s melatoninom uspješno su pripravljene ionskom interakcijom lecitina i kitozana. Korišten je kitozan molekulske mase 50-150 kDa i stupnja deacetilacije >90%.Pripravljene su nanočestice srednjeg promjera od 254, 6+-5, 0 nm, pozitivnog zeta-potencijala od 24, 2+-0, 8 mV te zadovoljavajućeg sadržaja melatonina od 3, 8 +-0, 4%. Variranjem eksperimentalnih uvjeta (obloženost jažica fibronektinom, koncentracija FBS-a u hranidbenom mediju nakon postizanja konfluentnosti) razvijena su četiri protokola priprave modelne rane temeljene na imortaliziranoj staničnoj liniji MJ90 fibroblasta. Pri uvjetima koji su isključivalil oblaganje jažica fibronektinom, te uključivali zamjenu hranibenih medija s 10% FBS- hranidbenim medijem s 0, 5% FBS-a nakon postizanja konfluentnosti, pripravljene su modelne rane zadovoljavajuće diskriminatornosti te je omogućena procjena učinka ispitivanih sustava na brzinu cijeljenja in vitro. Primjenom razvijenog modela rane, utvrđen je pozitivan učinak suspenzije lecitinsko-kitozanskih nanočestica s melatoninom na proliferacijuu i migraciju fibroblasta in vitro.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Farmacija

POVEZANOST RADA