Naslov
Rekombinacijski popravak i SOS odgovor u mutantu recA730 bakterije Escherichia coli
(Recombinational repair and SOS response in a recA730 mutant of bacteria Escherichia coli)

Autori
Šimatović, Ana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
17.06

Godina
2015

Stranica
128

Mentor
Brčić-Kostić, Krunoslav

Ključne riječi
Escherichia coli ; homologna rekombinacija ; SOS odgovor ; recA730 ; recA730 ; 2201 ; recA730 ; 4159
(Escherichia coli ; homologous recombination ; SOS response ; recA730 ; recA730 ; 2201 ; recA730 ; 4159)

Sažetak
Protein RecA730 u biokemijskim reakcijama samostalno vrši nukleaciju, a in vivo suprimira nedostatak gena recF. Određivanjem preživljenja nakon UV i gama zračenja i frekvencije konjugacijske rekombinacije utvrdili smo kako mutant suprimira istovremeni nedostatak oba faktora u nanošenju na jednolančanu DNA (RecBCD i RecFOR) te kako u mutantu recB1080 recQ može suprimirati nedostatak helikaze RecQ. Mutant ne može suprimirati istovremeni nedostatak obje egzonukleaze (RecBCD i RecJ). Za nastanak RecA filamenta koji sudjeluje u rekombinaciji i DNA popravku važno je da protein RecA veže i hidrolizira ATP. Dodatna mutacija recA730 u mutantu recA2201, koji ima fenotip mutanta recA nul jer ne hidrolizira ATP, dovodi do konformacijske promjene koja omogućuje dvostrukom mutantu recA730, 2201 da inducira SOS odgovor. Određivanjem razine SOS odgovora u bazalnim uvjetima i nakon uvedenog dvolančanog loma utvrdili smo kako je indukcija SOS odgovora u ovom dvostrukom mutantu ovisna o enzimu RecBCD te kako je za postizanje maksimalne razine SOS odgovora, koja je utvrđena u jednostrukom mutantu recA730, ipak potrebna i hidroliza vezanog ATP-a. Dodatna mutacija recA730 u mutantu recA4159, za koji se smatra da nema sposobnost vezanja ATP-a, nije omogućila indukciju SOS odgovora što upućuje da je jednostrukom mutantu recA730 za indukciju SOS odgovora potrebna konformacijska promjena do koje se dolazi vezanjem ATP-a. Istoznačni rezultati dobiveni su i u testu konjugacijske rekombinacije. Naposljetku je utvrđeno kako su vezanje i hidroliza ATP-a nužni za rekombinacijski popravak dvolančanih lomova u mutantu recA730.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA