Naslov
Izolacija i djelomično pročišćavanje enzima NADH oksidaze iz mikroorganizma Lactococcus lactis
(Isolation and partial purification of enzyme NADH oxidase from Lactococcus lactis)

Autori
Sudar, Martina ; Findrik Blažević, Zvjezdana ; Vuković Domanovac, Marija ; Vasić- Rački, Đurđa

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Sažeci sa skupova, sažetak, znanstveni

Izvornik
Knjiga sažetaka XV. Ružičkini dani "Danas znanost- sutra industrija" / Šubarić, Drago ; Planinić, Mirela ; Ačkar, Đurđica - Osijek : Grafika Osijek, 2014, 12-12

ISBN
978-953-7005-34-4

Skup
XV. Ružičkini dani

Mjesto i datum
Vukovar, Hrvatska, 11.09.2014. - 12.09.2014

Vrsta sudjelovanja
Predavanje

Vrsta recenzije
Domaća recenzija

Ključne riječi
NADH oksidaza ; izolacija ; regeneracija koenzima
(NADh oxidase ; isolation ; coenzyme regeneration)

Sažetak
Upotreba NAD+/NADH-ovisnih oksidoreduktaza u biotehnologiji je od velikog značaja, ali im je primjena ograničena jer za svoje djelovanje zahtijevaju koenzime koji su skupi. Kako bi se uštedilo na koenzimu, razvijene su metode regeneracije koenzima (biološke, enzimatske, elektrokemijske, kemijske i fotokemijske). Jedna od jednostavnijih metoda je dodatak enzima za regeneraciju, npr. NADH oksidaze za regeneraciju koenzima NAD+-a. Prednost ovakvog načina regeneracije koenzima je u tome što NADH oksidaza katalizira ireverzibilnu reakciju kojom nastaje voda, a reaktant je kisik. U ovom radu je izoliran i djelomično pročišćen enzim NADH oksidaza iz stanica mikroorganizma Lactococcus lactis izoliranog iz parmezana Parmigiano reggiano (Galbani). Nakon uzgoja mikroorganizma u bioreaktoru, stanice bakterije razbijene su ultrazvukom nakon čega su proteini taloženi isoljavanjem s 55 i 80% amonijevog sulfata te djelomično pročišćeni gel filtracijom (Sephadex G-50 i Sephadex G-100) i ionskom kromatografijom. Izoliran i djelomično pročišćen enzim je testiran za regeneraciju koenzima NAD+ u sustavu oksidacije L-metionina katalizirane L- fenilalanin dehidrogenazom. Ravnoteža ove reakcije bez regeneracije koenzima je termodinamički izrazito nepovoljna. Uz NADH oksidazu je postignuta 100%-tna konverzija L- metionina u 2-okso-4- metiltiomaslačnu kiselinu uz znatno smanjenu potrošnju koenzima na temelju čega se može zaključiti da je regeneracija koenzima uspješno provedena, a ravnoteža reakcije pomaknuta u željenom smjeru.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kemijsko inženjerstvo, Biotehnologija

POVEZANOST RADA