Naslov
Elektroforeza hemoglobina kapilarnom zonskom elektroforezom
(Hemoglobin electrophoresis by capillary zone electrophoresis)

Autori
Matišić Danica

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Poglavlja u knjigama, pregledni

Knjiga
PRIMJENA AUTOMATIZIRANIH ELEKTROFORETSKIH METODA VISOKE DJELOTVORNOSTI U KLINIČKOM LABORATORIJU

Urednik/ci
Matišić Danica

Izdavač
Medicinska naklada

Grad
Zagreb

Godina
2011

Raspon stranica
15-27

ISBN
978-953-7468-12-5

Ključne riječi
hemoglobinopatije, talasemije, elektroforeza kapilarnom zonskom elektroforezom
(hemoglobinopathies, thalassemia, electrophoresis, capillary zone electrophoresis)

Sažetak
Poremećaji građe ili funkcije hemoglobina, hemoglobinopatije, mogu biti stečene ili naslijeđene. Stečene hemoglobinopatije nastaju zbog oštećenja funkcije hemoglobina izvanjskim čimbenicima, kao što su ugljični monoksid (CO) i oksidirajući spojevi. Vezivanjem CO za hemoglobin nastaje karboksihemoglobin. CO ima 210 puta veći afinitet za hemoglobin od kisika pa pri maloj koncentraciji zauzme veliki broj veznih mjesta i sprječava vezivanje kisika. Oksidirajući spojevi (npr. klorati, nitriti) prevode Fe 2+ u hemu u Fe 3+ te nastaje methemoglobin koji ne veže kisik. Osim toga, različiti patološki procesi mogu ometati funkciju hemoglobina djelovanjem na afinitet za kisik. Nasljedni poremećaji sinteze globina su poremećaji pri kojima nastaju nenormalni hemoglobini, odnosno hemoglobinopatije dok hem, kao strukturni dio hemoglobina, ostaje normalan. Ovisno o vrsti poremećaja, hemoglobinopatije se mogu podijeliti u tri skupine: 1. kvantitativni poremećaji ili talasemije 2. kvalitativni poremećaji ili strukturne varijante hemoglobina (abnormalni Hb) 3. poremećaji nastali zbog zatajivanja mehanizama prijelaza sinteze fetalnog u adultni hemoglobin (nasljedna perzistentna sinteza fetalnog hemoglobina, HPFH). Varijante hemoglobina međusobno se razlikuju u mnogim svojstvima. Tako ih možemo razdvajati prema imunološkim, kristalografskim, spektroskopskim, elektroforetskim svojstvima kao i prema različitom ponašanju s lužinama, različitoj topivosti, afinitetu prema kisiku itd.. Stručna komisija Međunarodnog odbora za standardizaciju u hematologiji je prvi put 1975. godine dala preporuke za laboratorijsku dijagnostiku talasemija i varijanti Hbs. Predloženi panel podrazumijeva određivanje: kompletne krvne slike (KKS), izvođenje elktroforeze hemoglobina u alkalnom mediju (pH = 9, 2), te dodatno kvantitativno određivanje HbA2, i HbF. Ako se utvrdi prisutnost abnormalnog hemoglobina potrebna su daljnja ispitivanja kao što su elektroforeza hemoglobina u kiselom mediju (pH = 6, 0 - 6, 2), izoelektrično fokusiranje hemoglobina na agarozi ili poliakrilamidnom gelu (PAG).Posljednjih desetak godina elektroforezu proteina na acetat- celulozi progresivno zamjenjuje kapilarna zonska elektroforeza gdje se nabijene čestice kreću u tekućem mediju, puferu, pod utjecajem električnog polja u smjeru od anode prema katodi. Za razdvajanje pojedinih ionskih vrsta prema njihovom naboju koristimo snagu elektroendoosmotskog toka koji je snažniji od elektroforetskog. Kapilarna zonska elektroforeza koristi se i za detektiranje kao i za kvantificiranje Hbs i ostalih varijanti Hb. Hemolizati eritrocita automatski se priređuju u samom analizatoru. Nakon toga uzorci budu aspirirani u kapilaru gdje se elektroforetski razdvoje varijante Hb uz visoki napon od 9600 V. Nakon završenoga elektroforetskog razdvajanja očitaju se udjeli nađenih Hb u relativnim postocima. Osim što su elektroforeze Hb u alkalnom i kiselom mediju te denzitometrijsko očitavanje HbA2 kao i ostalih varijanti Hb korištenjem kapilarne zonske elektroforeze svedeni na analizu na jednom uređaju, moguće je s dovoljnom osjetljivošću i visokom rezolucijskom moći razdvojiti i kvantificirati mnogobrojne varijante Hb

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kliničke medicinske znanosti

POVEZANOST RADA