Naslov
Kinetička karakterizacija enzima NADH oksidaze iz mikroorganizma Lactococcus lactis i regeneracija koenzima NAD+
(Kinetic characterization of NADH oxidase from Lactococcus lactis and coenzyme NAD+ regeneration)

Autori
Bobanović, Kristina ; Sudar, Martina ; Findrik Blažević, Zvjezdana ; Vuković Domanovac, Marija ; Vasić-Rački, Đurđa

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Sažeci sa skupova, sažetak, znanstveni

Izvornik
Knjiga sažetaka X. Susret mladih kemijskih inženjera / Findrik Blažević, Zvjezdana ; Sudar, Martina ; Šalić, Anita ; Vrsalović Presečki, Ana ; Vrsaljko, Domagoj - Virovitica : Fakultet kemijskog inženjerstva i tehnologije Sveučilišta u Zagrebu, 2014, 91-91

ISBN
978-953-6470-65-5

Skup
X. Susret mladih kemijskih inženjera

Mjesto i datum
Zagreb, Hrvatska, 20.02.2014. - 21.02.2014

Vrsta sudjelovanja
Poster

Vrsta recenzije
Domaća recenzija

Ključne riječi
izolacija enzima; kinetika; regeneracija koenzima
(enzyme isolation; kinetics; coenzyme regeneration)

Sažetak
Upotreba NAD+/NADH-ovisnih oksidoreduktaza u biotehnologiji je od velikog značaja, ali im je primjena ograničena jer za svoje djelovanje zahtijevaju koenzime koji su skupi. Kako bi se uštedilo na koenzimu, razvijene su mnoge metode regeneracije koenzima. Jedna od metoda je proučavana i u ovom radu. Izoliran je i pročišćen enzim NADH oksidaza iz stanica mikroorganizma Lactococcus lactis koje su prethodno uzgojene u bioreaktoru. Ovaj se enzim koristi za regeneraciju koenzima NAD+ u reakcijama oksidacije. Rezultati su pokazali da enzim ima najveću aktivnost pri pH 5, 5 i temperaturi 50 °C. NADH oksidaza je kinetički karakterizirana u reakciji oksidacije NADH. Eksperimenti su provedeni u kiveti spektrofotometra pri tri pH vrijednosti ; 7, 0, 8, 6 i 9, 0. pH vrijednosti niže od 7.0 nisu zanimljive za reakcije oksidacije katalizirane oksidoreduktazama. Na temelju eksperimentalnih rezultata su procijenjene vrijednosti kinetičkih parametara Michaelis-Menteničine kinetike. Pokazalo se da enzim ima veliki afinitet prema NADH kao supstratu. Uspješnost regeneracije koenzima uz ovaj enzim je testirana u sustavu oksidacije L-metionina katalizirane L-fenilalanin dehidrogenazom. Ova je reakcija bez regeneracije koenzima termodinamički izrazito nepovoljna. Uz NADH oksidazu je postignuta 100 %-tna konverzija L-metionina u 2-okso-4-metiltiomaslačnu kiselinu uz znatno smanjenu potrošnju koenzima. Stoga se može zaključiti da je regeneracija koenzima uspješno provedena jer je ravnoteža reakcije pomaknuta u željenom smjeru.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kemijsko inženjerstvo, Biotehnologija

Napomena
Ovaj rad izrađen je uz potporu istraživanjima pod naslovom Primjena metodologije kemijskog inženjerstva u razvoju biokatalitičkih procesa.

POVEZANOST RADA