Naslov
Eukariotske karakteristike izoleucil-tRNA-sintetaze iz bakterije Streptomyces griseus
(Eukaryotic features of isoleucyl-tRNA synthetase from bacteria Streptomyces griseus)

Autori
Biluš, Mirna

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
25.09

Godina
2013

Stranica
68

Mentor
Gruić-Sovulj, Ita

Neposredni voditelj
Dulić, Morana

Ključne riječi
aminoacil-tRNA-sintetaze ; elementi identiteta ; komplementacija mupirocin ; tRNA
(Aminoacyl-tRNA synthetases ; complementation ; identity elements ; mupirocin ; tRNA)

Sažetak
Izoleucil-tRNA-sintetaze (IleRS) su enzimi koji kataliziraju nastajanje Ile-tRNAIle. Eukarioti posjeduju IleRS koja se po svojoj primarnoj strukturi, osjetljivosti na antibiotik mupirocin i supstratnoj specifičnosti razlikuje od prokariotskih homologa. Mupirocin snažno inhibira IleRS brojnih bakterija, ali ne i eukariota. Međutim, postoje prokariotske vrste, među njima Streptomyces griseus, čiji se aminokiselinski sljedovi IleRS sravnjuju s eukariotskim. Gen za IleRS iz S. griseus ukloniran je u ekspresijski vektor i eksprimiran u bakteriji Escherichia coli. Funkcionalan protein pročišćen je afinitetnom kromatografijom. Kinetička karakterizacija pokazala je da IleRS iz S. griseus heterologno aminoacilira kvaščevu i E. coli tRNA. Budući da prokariotski tip IleRS (E. coli IleRS) ne aminoacilira kvaščevu tRNAIle, rezultati upućuju da IleRS iz S. griseus nalikuje kvaščevom homologu koji aminoacilira E. coli tRNA. Difuzijski test je pokazao neosjetljivost IleRS iz S. griseus na mupirocin i time ga grupirao s eukariotskim IleRS. Također, pokazano je da IleRS iz S. griseus omogućuje rast E. coli u prisutnosti mupirocina.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kemija, Biologija

POVEZANOST RADA