Naslov
Uzgoj stanica Lactococcus lactis radi dobivanja enzima NADH oksidaze
(Cultivation of Lactococcus lactis cells to obtain NADH oxidase)

Autori
Jazvo, Kristina

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, preddiplomski

Fakultet
Fakultet kemijskog inženjerstva i tehnologije

Mjesto
Zagreb

Datum
19.09

Godina
2013

Stranica
30

Mentor
Findrik Blažević, Zvjezdana

Ključne riječi
NADH oksidaza; Lactococcus lactis
(NADH oxidase; Lactococcus lactis)

Sažetak
U ovom radu je proveden uzgoj stanica Lactococcus lactis radi izolacije enzima NADH oksidaze uz kontinuiran dovod zraka koji je neophodan da bi došlo do stvaranja enzima. Uzgoj je proveden u dva eksperimenta u bioreaktoru u kojima je praćena aktivnost NADH oksidaze. Obzirom da se radi o intracelularnom enzimu, postupak izolacije enzima je bio kompleksan i sastojao se od niza koraka. Dobiveni rezultati pokazuju da je više enzima NADH oksidaze nastalo u drugom eksperimentu. U prvom eksperimentu nije nastalo puno enzima (oko 8 U), zbog problema s kisikovom elektrodom i održavanjem odgovarajuće koncentracije kisika. U drugom eksperimentu je nastalo oko 200 U NADH oksidaze. Ovako dobivene stanice su korištene za izolaciju enzima NADH oksidaze. U radu je provedeno pročišćavanje enzima postupcima razbijanja stanica ultrazvukom, taloženja uz amonijev sulfat, odsoljavanje na koloni punjenoj gelom Sephadex G50, te dodatno pročišćavanje ionskom kromatografijom na koloni punjenoj gelom Sepharose Q. Ovakav je postupak rezultirao pročišćavanjem enzima, ali i gubitkom aktivnosti. Bez obzira na to pripremljena količina enzima je bila dovoljna za njegovu kinetičku karakterizaciju i upotrebu u reakciji regeneracije koenzima koja je provedena u drugom radu.

Izvorni jezik
Engleski

Znanstvena područja
Biotehnologija

POVEZANOST RADA