Naslov
Uloga aktivnog ugljena u otklanjanju inhibitora lančane reakcija polimerazom u forenzičnim biološkim uzorcima
(The role of activated carbon in elimination of polymerase chain reaction inhibitors in forensic biological samples)

Autori
Barbarić, Lucija

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
20.12

Godina
2012

Stranica
100

Mentor
Grubić, Zorana

Ključne riječi
forenzični biološki uzorci; inhibicija; aktivni ugljen; hematin; humusne tvari; tanini; indigo boja
(forensic biological samples; inhibition; activated carbon; hematin; humic substances; tannins; indigo dye)

Sažetak
Forenzični biološki uzorci često sadržavaju male količine DNA uz prisustvo smjese inhibitora umnažanja DNA. Tijekom izolacije DNA s podloge, dijelovi podloge kao potencijalni inhibitori mogu se izolirati zajedno s genomskom DNA čime se smanjuje ili u potpuno onemogućava umnažanje mikrosatelitnih lokusa. Cilj ovog istraživanja je ukloniti inhibitore umnažanja DNA pomoću aktivnog ugljena uz što manji gubitak humane DNA. Kvaliteta izolirane DNA testirana je umnažanjem deset mikrosatelitnih lokusa. Uspoređena je efikasnost neafinitetnih metoda izolacije genomske DNA (Chelex i organska izolacija) kao i metoda pročišćavanja ultrafiltracijom (Amicon komercijalna kolona) i adsorpcijom (aktivni ugljen). Općenito, Chelex se pokazao kao učinkovitija metoda izolacije DNA, a usporedbom metoda pročišćavanja nije bilo statistički značajne razlike u kvaliteti umnožene DNA. Primjena aktivnog ugljena pokazala se jednostavnom, brzom, ekonomičnom i reproducibilnom metodom pročišćavanja. Aktivni ugljen uspješno je adsorbirao hematin, kao prirodni inhibitor iz krvi, bez značajnih gubitaka DNA. Nadalje, smanjena je koncentracija inhibitora iz podloge kao što su humusne tvari iz zemlje i tanini iz drva. Amicon se pokazao kao efikasnija metoda za uklanjanje indiga iz trapera kao podloge. Pročišćavanje bioloških uzoraka temeljeno na fizikalnim i kemijskim svojstvima aktivnog ugljena dosad nije provedeno stoga spoznaje utvrđene u ovom istraživanju daju prvi uvid u novu primjenu dobro poznatog adsorbensa.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA