Naslov
Analiza gena i proteina E-kadherina (CDH1) i beta-katenina (CTNNB1) u metstazama u mozgu
(Analysis of gene and protein E-cadherin (CDH1) and beta-catenin (CTNNB1) in brain metastases)

Autori
Zeljko, Martina

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Medicinski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
11.05

Godina
2012

Stranica
101

Mentor
Pećina-Šlaus, Nives

Neposredni voditelj
Pećina-Šlaus, Nives

Ključne riječi
E-kadherin; beta-katenin; metastaze u mozgu
(E-cadherin; beta-catenin; brain metastases)

Sažetak
U ovom radu sam proučavala promjene gena E-kadherina (CDH1) i beta-katenina (CTNNB1) u metsatazama u mozgu. E-kadherin i beta-katenin molekularne su komponente zonula adherens. Osim ove uloge oba sudjeluju u signalnom putu wnt, gdje je beta-katenin glavna signalna molekula, a tumor supresorski protein E-kadherin indirektni modulator wnt signalnog puta. Gubitak funkcije E-kadherina korelira sa povećanjem invazivnosti i metastaziranja tumora, te se zbog toga naziva „gen koji suprimira invaziju“. U radu sam istraživala promjene gena E-kadherina, te proteina E-kadherina i beta-katenina na ukupno 47 uzoraka metastaza mozga. Genska nestabilnost je bila ispitana metodom lančane reakcije polimerazom i gubitkom heterozigotnosti (LOH) uz uporabu tri polimorfna markera D16S752, D16S265 i D16S398. Izraženost proteina i njihova lokalizacija je analizirana imunohistokemijom. Rezultati ovog rada su pokazali da je gubitak heterozigoznosti gena CDH1, ispitan sa sva tri mikrosatelitna biljega, prisutan u 42.2% ispitanih metastaza u mozgu. Najveća učestalost genetskih promjena je zapažena u metastazama koje potječu od karcinoma pluća, i to dijagnoza adenokarcinoma i karcinoma malih stanica sa 83% i 75% genetskih promjena. Zatim slijede metastaze od duktalnog invazivnog karcinoma dojke sa 55.6% LOHova, te metastaze porijeklom iz karcinoma debelog crijeva sa 50%. Tip genske nestabilnosti- tzv. mikrosatelitna nestabilnost (MSI) ili uzorci sa pozitivnom replikacijskom greškom (RER+) također su otkriveni u ovoj disertaciji. Četri od 45 uzoraka metastaza pokazala su MSI (8, 9%). Imunohistokemijska analiza pokazala je da je 83% uzoraka imalo slabije izraženu ekspresiju E-kadherina. Izrazito slaba ekspresija E-kadherina je bila primijećena u 53.2% metastaza. Većina uzoraka sa LOH-om (84.2%) bila je praćena sa slabijom ekspresijom proteina E-kadherina. Beta-katenin je bio jače izražen u 53.2%metastaza, dok je samo 27.7% metastaza pokazalo lokalizaciju ovog proteina u jezgri. Samo 21.1% uzoraka sa LOHom gena CDH1 imalo je beta-katenin smješten u jezgri što je u skladu sa nalazom da je 28.9% uzoraka sa slabijom ekspresijom E-kadherina imalo beta-katenin smješten u jezgri. Image analysis pokazala je da su izmjerene količine proteina E-kadherina i beta-catenina znakovito pozitivno korelirane (P = 0.008). Molekularne promjene E-kadherina i beta-katenina bile su česte u metastazama mozga koje sam istraživala. MSI fenotip sugerira da metastatski potencijal CDH1 gena može biti povezan sa mikrosatelitskom nestabilnošću. Činjenica da beta katenin nije bio često smješten u jezgri kao i otkrivena pozitivna korelacija količine ova dva proteina može navesti na zaključak da je razaranje zonula adherens odgovorno za formaciju metastaza. Moji rezultati mogu pridonijeti boljem razumijevanju genetskog profila metastaza mozga.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti

POVEZANOST RADA