Pregled bibliografske jedinice broj: 57699
Utjecaj kratkih heterolognih sekvencija na integraciju plazmida u genom kvasca Saccharomyces cerevisiae
Utjecaj kratkih heterolognih sekvencija na integraciju plazmida u genom kvasca Saccharomyces cerevisiae, 2000., magistarski rad, Prehrambeno-biotehnološki, Zagreb
CROSBI ID: 57699 Za ispravke kontaktirajte CROSBI podršku putem web obrasca
Naslov
Utjecaj kratkih heterolognih sekvencija na integraciju plazmida u genom kvasca Saccharomyces cerevisiae
(The influence of short heterologous sequences on plasmid integration in the yeast Saccharomyces cerevisiae)
Autori
Svetec, Ivan-Krešimir
Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, magistarski rad
Fakultet
Prehrambeno-biotehnološki
Mjesto
Zagreb
Datum
10.11
Godina
2000
Stranica
86
Mentor
Zgaga, Zoran
Ključne riječi
insercije; integracija plazmida; kvasac; popravak dvolančanog loma; rekombinacija; terminalna heterologija
(double-strand-break repair; insertions; plasmid integration; recombination; terminal heterology; yeast)
Sažetak
U ovom radu istraživan je utjecaj kratkih heterolognih sekvencija (do 102 pb) na integraciju kružnih i lineariziranih plazmida u genom kvasca Saccharomyces cerevisiae. PLazmidi korišteni za transformaciju imaju dvije regije kvašćeve DNA, CYC1 i URA3, od kojih jedna (CYC1, 1782 pb) sadrži inserciju i deleciju 4 para baza te palindromsku i nepalindromsku sekvenciju dugu 102 para baza. Rezultati dobiveni s kružnim plazmidima pokazali su da palindromska insercija utječe na usmjeravanje i konačni ishod rekombinacijskog događaja. Osim toga, ustanovljeno je da terminalne heterologije (do 51 pb) prisutne na oba kraja linearizirane plazmidne molekule smanjuju efikasnost transformacije i do 20 puta, a na jednom kraju samo 2 do 4 puta. U istom eksperimentalnom sustavu pokazano je da homologija između heterolognih krajeva nema značajnog utjecaja na efikasnost transformacije, te da protein Rad1 nije potreban za uklanjanje terminalnih heterologija. Hibridizacijom genomske DNA metodom po Southernu analizirano je 100 transformanata te je u 97 slučajeva zabilježena ciljana integracja plazmida u kvašćev lokus CYC1, dok su tri transformanta nastala ilegitimnim transformacijskim događajem. Međutim, u 19 od spomenutih 97 transformanata homologna transformacija nije bila povezana s gubitkom cjelokupne terminalne heterologije s kraja plazmidne molekule
Izvorni jezik
Hrvatski
Znanstvena područja
Prehrambena tehnologija
