Naslov
Obilježavanje kloroplastne senzorske kinaze (CSK) afinitetnim biljezima HA i FLAG
(Tagging of the chloroplast sensor kinase (CSK)with affinity epitopes HA and FLAG)

Autori
Marinović, Mila

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
11.11

Godina
2011

Stranica
59

Mentor
Fulgosi, Hrvoje

Ključne riječi
Arabidopsis thaliana; CSK; dvokomponentni sustavi; senzorske kinaze
(Arabidopsis thaliana; CSK; two-component systems; sensor kinases)

Sažetak
U genomu biljke Arabidopsis thaliana (L.) Heynh identificiran je gen At1g67840 koji kodira za protein kloroplastnu senzorsku kinazu (CSK), dio „drevnih“ dvokomponentnih signalnih sustava. Analizom aminokiselinskog slijeda utvrđena je visoka sačuvanost i sličnost određenih motiva u svih vaskularnih biljaka i algi te je protein CSK tip bakterijske senzorske histidinske kinaze utvrđene u fotosintetskim plastidima tj. kloroplastima. Cilj ovog rada je obilježavanje CSK proteina afinitetnim biljezima HA i FLAG u svrhu funkcionalne i strukturalne karakterizacije senzorske kinaze i specifičnijeg utvrđivanja njene uloge kod biljke Arabidopsis thaliana. Lančanom reakcijom polimerazom fuzionirali smo biljege HA i FLAG na karboksi terminalni kraj CSK proteina. Koristeći „Gateway“ rekombinacijsku tehnologiju konstrukt CSK_HA_FLAG ugrađuje se u ishodišni pENTR (engl. entry) vektor te naknadno u binarni pH7WG2, 0 vektor. Nadalje, stanice agrobakterija EHA105 transformirane su s konstruktom pH7WG2, 0-CSK_HA_FLAG s ciljem daljnje ugradnje CSK_HA_FLAG komponente prisutne u T-DNA regiji binarnog vektora u genom biljke Arabidopsis thaliana. Ovim postupkom u transformiranim biljkama CSK-KO (engl. knock-out), inaktiviran je gen At1g67840.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA