Naslov
Eksperesija i lokalizacija endotelne lipaze na humanom karotidnom aterosklerotskom plaku
(Expresion and localization of endothelial lipase on human carotide athteroscleroticum plaque)

Autori
Trbušić, Matias

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Medicinski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
17.10

Godina
2011

Stranica
114

Mentor
Degoricija, Vesna

Ključne riječi
endotelna lipaza; plak; stabilnost; simptomi; lipoproteini visoke gustoće; upala; ateroskleroza
(endothelial lipase; plaque; stability; symptomatology; high-density lipoprotein; inflammation; atherosclerosis; macrophages)

Sažetak
Ateroskleroza je kronična fibro-proliferativna i imuno-inflamatorna bolest arterija, karatkerizirana endotelnom disfunkcijom, lokalnom oksidacijom cirkulirajućih lipoproteina, njihovom akumulacijom u stijenku i aktivacijom gena za proinflamatorne citokine. Klinička prezentacija ateroskleroze nastaje uslijed destabilizacije plaka pod djelovanjem lokaliziranog upalnog procesa. EL je nova članica skupine lipaza koja zbog svoje povezanosti s upalnim procesom može imati važnu ulogu u destabilizaciji plaka. Njena ekspresija povećana je pod utjecajem upalnih citokina, oksidiranog LDL-a i lipopolisaharida i to u makrofazima, ključnom celularnom elementu destabilizacije plaka. S druge strane, EL ima adhezivnu ulogu za monocite te svojom lipolitičkom aktivnošću oslobađa slobodne masne kiseline i lizo-fosfatidilkolin koji aktiviraju upalne citokine. Osnovni cilj ovog istraživanja bio je istražiti povezanost ekspresije EL u karotidnom plaku i plazmatske razine EL s kliničkom slikom bolesnika i s histološkim izgledom plaka. U istraživanje je uključeno 66 bolesnika sa značajnom (>70%) unilateralnom stenozom karotidne arterije hospitaliziranih radi karotidne endarterektomije. Bolesnici su podijeljeni na dvije osnovne skupine: 1) asimptomatski bolesnici (n=42) i 2) simptomatski (n=24). Karotidna stenoza smatrana je simptomatskom ako je bolesnik imao žarišni neurološki simptom (CVI, TIA ili amaurosis fugax) unutar perioda od 4 mjeseca koji po karakteru pripadaju području ciljne karotide. Na temelju histološke analize plakovi su prema svojim značajkama nestabilnosti podijeljeni u tri skupine: 1) fibrozni (F) prekriveni glatkom luminalnom površinom, 2) ulcerirani – nekomplicirani (UNC) s ulceriranom i tankom fibroznom kapom i 3) ulcerirani-komplicirani (UC) s ulceriranom i tankom fibroznom kapomm, krvarenjem unutar plaka i/ili trombom. Imunhistokemija je učinjena sa zečjim klonskim anti-humanim protutijelim na CD163 (specifičnim za makrofage) i sa zečjim anti-EL protitijelima. Ekspresija EL izražena je semikvantitativno kao: (A) slabije bojanje (0–25% stanica pozitivno) i (B) jače bojanje (>25% stanica pozitivno). Plazmatska razina EL određena je ELISA metodom u 55 bolesnika. Rezultati: Simptomatski bolesnici češće su imali visoko-signifikantnu (95-99%) stenozu (p=0, 027) te hipoehogene (meke) zone u plaku (p=0, 039), međutim nije bilo značajne razlike u histološkoj slici (p=0, 213). U F plakovima imunohistokemija za EL bila je slaba (tip A) i smještena u endotelnom sloju i u stanicama unutar fibrozne kape. Kod UC plakova imunohistokemija za EL bila je jača (tip B) i smještena između nekrotične srži i fibrozne kape gdje su se dominantno nalazili makrofazi. Jače EL imunobojanje (tip B) bilo je češće kod UC plakova nego kod UNC, a osobito F plakova (79:50:33%, p=0, 004). Plazmatska razina EL bila je izraženija kod hipertoničara (p=0, 004) i pušaća (p=0, 058) te kod bolesnika liječenih ACE inhibitorima (p=0, 018) i kalcijskim blokatorima (p=0, 05). Nije bilo povezanosti između ekspresije EL u plaku i plazmatske razine EL. Korelacijskim testom nije nađena značajna povezanost plazmatske razine EL s hsCRP-om, IL6, HDL-om i LDL-om. U usporedbi sa skupinom bez simptoma skupine svježi simptomi (simptomi unutar 4 mjeseca i sa lokalizacijskom povezanošću s ciljnom karotidnom arterijom) i stari simptomi (preostali simptomatski bolesnici) imali su značajno veću plazmatsku razinu EL (p=0, 011), dok između te dvije skupine simptomatskih bolesnika nije bilo razlike (p=0, 459). Potvrđena hipoteza da je EL jače izražena u karotidnim plakovima simptomatskih bolesnika i u histološki vulnerabilnim plakovima ukazuje na njenu povezanost s procesom destabilizacije plaka. Tu povezanost dodatno učvršćuje i činjenica da je EL u aterosklerotskom plaku najviše izražena između fibrozne kape i nekrotične srži odnosno na mjestu gdje su najzastupljeniji makrofazi. U ovom radu nije nađena povezanost između histološke slike plaka i simptoma što je prisutno i u ranijim istraživanjima i ukazuje na nedostatak dovoljno specifičnih i senzitivnih kriterija kojima bi se mogla procjeniti vulnerabilnost plaka. Značajna povezanost EL i s histološkom slikom plaka i sa simptomatologijom upućuje da bi se EL potencijalno mogla koristiti kao jedan od histoloških markera vulnerabilnosti plaka. Plazmatska EL bila je povišena kod simptomatskih bolesnika bez obzira na vrijeme i lokalizaciju simptoma, a nije bila povezana s ekspresijom EL u plaku. Navedeno ukazuje da na razinu plazmatske EL ne utječe povećana ekspresija na jedom lokusu već ona moguće ovisi o globalnoj endotelnoj disfunkciji i općenito pojačanoj ekspresiji u svim arterijama. Pušenje i arterijska hipertenzija, čimbenici koji oštećuju endotel na kemijski i mehanički način i na taj način dovode do endotelne disfunkcije, bili su pozitivno povezani s plazmatskom razinom EL. HsCRP i IL-6 bili su iznad razine nađene kod normalne populacije, ali nije bilo očekivane povezanosti s kliničkom prezentacijom što je vjerovatno uzrokovano činjenicom da svi bolesnici već imaju uznapredovalu aterosklerozu. To implicira da je u toj fazi bolesti EL u plazmi osjetljiviji pokazatelj rizika za cerebrovaskularne (a možda i za kardiovaskularne) događaje nego hsCRP.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti

Napomena
Disertacija je izrađena u okviru Znanstvenog projekta Republike Austrije (Austrian Science Foundation (FWF ; grant P19473-B05) 2005-2010) i Međunarodne suradnje Medicinskog fakulteta Sveučilišta u Zagrebu i Medicinskog Univerziteta u Grazu (Agreement on Co-operation between the University of Zagreb School of Medicine and Medical University of Graz concluded on February 21 2005. Project title: Expression of endothelial lipase and inflammatory molecules in human carotid atheroscelrotic plaques. Principal investigators: Professor Saša Frank (Graz) and Assistant Professor Vesna Degoricija (Zagreb) Duration: 2005-2010).

POVEZANOST RADA