Naslov
Kultura neurona P19-model za istraživanje neurotoksičnog učinka glutamata
(Culture of P19 neurons- a model for study glutamate induced neurotoxicity)

Autori
Radovanović, Vedrana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
18.02

Godina
2011

Stranica
44

Mentor
Jazvinšćak Jembrek, Maja

Ključne riječi
neuroni P19; diferencijacija; beta-III tubulin; ekspresija podjedinica; glutamat; neurotoksičnost; NMDA receptor; MK-801
(P19 neurons; differentiation; beta-III tubulin; subunit expression; glutamate; neurotoxicity; NMDA receptor; MK-801)

Sažetak
Visoke koncentracije glutamata (glavne ekscitacijske aminokiseline u mozgu sisavaca) toksične su za neurone i povezuju se s nastankom i progresijom brojnih akutnih i kroničnih neurodegenerativnih bolesti. Cilj našeg istraživanja bio je uvesti u laboratorij postupak dobivanja neurona P19 te utvrditi da li ova kultura može poslužiti kao model za istraživanje toksičnog učinka glutamata. Stanice P19 (pluripotentni teratokarcinom miša) nakon indukcije s retinoičnom kiselinom diferencirali smo u miješanu kulturu neurona, fibroblasta i astrocita. Imunoflorescencijskim obilježavanjem utvrdili smo da neuroni P19 eksprimiraju beta-III tubulin što upućuje na njihovo potpuno sazrijevanje. Metodom RT-PCR utvrdili smo u terminalno diferenciranim neuronima P19 transkripte podjedinice NR1, NR2A i NR2B receptora NMDA, kao i alfa1, beta2 i gama2L podjedinice GABA-A receptora. Bojenjem tripanskim modrilom i mjerenjem aktivnosti LDH utvrdili smo da kratkotrajna primjena glutamata djeluje citotoksično na neurone P19. Učinak glutamata dokinuli smo u prisutnosti MK-801, selektivnog antagonista receptora NMDA. Dobiveni rezultati upućuju na zaključak da P19 neuroni eksprimiraju funkcionalne receptore NMDA i da se mogu koristiti kao pouzdan model za proučavanje neurotoksičnog učinka glutamata.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija, Temeljne medicinske znanosti

POVEZANOST RADA