Naslov
IZLUČIVANJE HETEROLOGNO EKSPRIMIRANIH PROTEINA U KVASCA Pichia pastoris POMOĆU SEKVENCIJE α-MF
(HETEROLOGOUS PROTEIN SECRETION IN YEAST Pichia pastoris USING α-MF SEQUENCE)

Autori
Cvitić, Silvija

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad

Fakultet
Prehrambeno-biotehnološki fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
14.12

Godina
2009

Stranica
55

Mentor
Svetec, Ivan-Krešimir

Ključne riječi
izlučivanje heterolognih proteina; kvasac P. pastoris; sekvencija α-MF; stanična stijenka
(heterologous protein secretion; yeast P. pastoris; α-MF sequence; cell wall)

Sažetak
Metilotrofni kvasac Pichia pastoris je izvrstan domaćin za ekspresiju heterolognih proteina. Lako se uzgaja na jednostavnoj hranjivoj podlozi, a uporaba promotora gena AOX1 nudi prednosti kontrolirane i učinkovite indukcije. Ovaj kvasac izlučuje malu količinu endogenih proteina, zbog čega heterologno eksprimiran i izlučen protein čini većinu proteina hranjive podloge, što olakšava proces njegovog pročišćavanja. Ipak, većina visokomolekularnih proteina se ne izlučuje u podlogu već ostaje u periplazmi stanice. Kako bi se kvasac P. pastoris ustanovio kao učinkovit domaćin za ekspresiju ovih proteina, nužno je poboljšanje njegovog sekretornog kapaciteta. U ovom radu opisan je pokušaj izlučivanja tri modelna proteina fuzijom sa signalnom sekvencijom α-MF iz kvasca Saccharomyces cerevisiae. Osim toga, istražen je i utjecaj razine ekspresije nekih gena koji sudjeluju u izgradnji stanične stijenke na sekretorni kapacitet kvasca P. pastoris.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biotehnologija

POVEZANOST RADA