Naslov
Određivanje optimalnih uvjeta aktivnosti proteina YblCcw12p eksprimiranog u kvascu Saccharomyces cerevisiae
(Determination of optimal conditions for activity of protein YblCcw12p expressed in yeast Saccharomyces cerevisiae)

Autori
Didak, Blanka

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, preddiplomski

Fakultet
Prehrambeno-biotehnološki fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
29.06

Godina
2011

Stranica
30

Mentor
Teparić, Renata

Ključne riječi
rekombinantni protein; DNazna aktivnost; Saccharomyces cerevisiae
(recombinant proteins; DNase activity; Saccharomyces cerevisiae)

Sažetak
U posljednje vrijeme raste interes za biotehnološku primjenu enzima imobiliziranih na površinu stanica domaćina koja tada ujedno djeluje kao producent i nosač imobiliziranog enzima. Od posebne važnosti su heterologni proteini vezani na staničnu stijenku kvasca Saccharomyces cerevisiae, budući da je kvasac nepatogeni mikroorganizam koji se lako transformira i uzgaja, a kao eukariot je pogodniji za ekspresiju enzima sisavaca nego bakterijske stanice. U ovom radu je karakterizirana enzimska aktivnost rekombinantne nukleaze YblCcw12p koja je dobijena fuzijom gena za intracelularnu nukleazu kvasca Yblp i gena za protein stanične stijenke Ccw12p preko kojeg je onda rekombinantni protein usidren u stijenku. U radu je pokazano da je rekombinantni enzim uspješno imobiliziran na površini stanice i da ima nukleaznu aktivnost. Za detekciju enzimske aktivnosti korištene su elektroforeza i SRED metoda koje su detaljno opisane u radu. Nadalje je provedena optimizacija metode za mjerenje enzimske aktivnosti modificiranjem metode po Kunitz-u, te su određeni optimalni uvijeti za aktivnost rekombinantnog enzima.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biotehnologija

POVEZANOST RADA