Naslov
Strukturna karakterizacija glikoproteina tehnikama spektrometrije masa
(Structural characterisation of glycoproteins by mass spectrometry techniques)

Autori
Kusalić, Tina

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
01.06

Godina
2010

Stranica
213

Mentor
Gruić-Sovulj, Ita

Neposredni voditelj
Mario Cindrić

Ključne riječi
rhEPO ; tekućinska kromatografija ; NESP ; N-glikozilacija ; O-glikozilacija ; spektrometrija masa ; strukturna karakterizacija glikoproteina
(rhEPO ; liquid chromatography ; mass spectrometry ; NESP ; N-glycosylation ; O-glycosylation ; structural characterization of glycoproteins)

Sažetak
Rekombinantni humani eritropoetin (rhEPO) i njegov hiperglikozilirani analog NESP (engl. novel erythropoiesis stimulating protein) koriste se u liječenju anemije. Njihova biološka aktivnost posljedica je sastava oligosaharida i stupnja sijalinizacije koji regulira zadržavanje glikoproteina u krvotoku. Dva dodatna N- glikozilacijska mjesta uvedena u NESP ciljanom mutagenezom produljuju vrijeme poluživota u serumu, što rezultira povećanom biološkom aktivnošću. Međutim, modifikacija sijalinskih kiselina NESP-a O- acetilacijom najvjerojatnije je ključni čimbenik u produljenju njegovog poluživota u krvotoku. U ovoj disertaciji detaljno su određene strukture svih N- i O-glikoformi rhEPO-a i NESP-a. Raspodjela gliko-formi NESP-a analizirana je visokom rezolucijom FT ICR MS- om dok je MS/MS primijenjen za strukturne analize. Za razliku od rhEPO-a koji sadrži 3 O-glikoforme, značajno veća heterogenost primijećena je kod NESP-a zbog mono- i diacetilacije sijalinskih kiselina. Po prvi put identificirano je i strukturno opisano 15 različitih O-glikoformi NESP-a. S druge strane, značajno heterogenije N-glikoforme mogu sadržavati od 1 do 8 O-acetilnih skupina po N-glikanu s različitom raspodjelom mono-i diacetiliranih sijalinskih kiselina. Dodatna složenost smjese N-glikana potječe od N-glikolilneuraminske kiseline koja također može biti mono- i diacetilirana. Osim toga, po prvi puta identificirane su pentaantenarne strukture N-glikana NESP-a koje imaju četiri ili pet sijalinskih kiselina na krajevima antena. I ove su strukture pronađene u O-acetiliranom obliku.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kemija

POVEZANOST RADA