Naslov
FLAVONOIDI I FENOLNE KISELINE PODLANICE (Caucalis platycarpos L.) – KEMIJSKA KARAKTERIZACIJA I BIOLOŠKI UČINCI
(FLAVONOIDS AND PHENOLIC ACIDS OF BURR PARSLEY (Caucalis platycarpos L.) – CHEMICAL CHARACTERIZATION AND BIOLOGICAL EFFECTS)

Autori
Plazonić, Ana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Farmaceutsko-biokemijski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
29.06

Godina
2010

Stranica
211

Mentor
Kujundžić, Nikola ; Maleš, Željan

Ključne riječi
podlanica; Caucalis platycarpos L.; flavonoidi; fenolne kiseline; antioksidativno djelovanje
(burr parsley; Caucalis platycarpos L.; flavonoids; phenolic acids; antioxidant activity)

Sažetak
U novije doba u području biomedicinskih znanosti su sve intenzivnija istraživanja mehanizama biološkog ponašanja tumorskih stanica kako bi se pronašli što djelotvorniji načini u liječenju zloćudnih tumora. Kao rezultat tih nastojanja nastala su različita prirodna i sintetska sredstva koja se sama ili u kombinaciji sa zračenjem i/ili kirurgijom koriste u liječenju tumora. U jednoj od rukopisnih zbirki recepata za izradu i upotrebu tradicionalnih lijekova, Ljekaruši fra Silvestra Kutleše, postoji podatak o liječenju bolesti s narodnim nazivom griz, biljkom podlanica. Griz, grizica je pučki naziv za rak, rak ranu, karcinom. Podlanica, Caucalis platycarpos L. (Apiaceae), poznata je još i pod nazivom mrkvasta podlanica. U obliku čaja, droga zelen podlanice (Herba caucalidis), prisutna je i na tržištu farmaceutskih proizvoda kao prirodni lijek, gdje se koristi kao imunostimulator. Dokazano je da liofilizirani vodeni ekstrakt osušenih nadzemnih dijelova podlanice potiskuje rast tumora i smanjuje pojavnost metastaza na mišjem modelu tumora (fibrosarkom), metodom arteficijelnih plućnih metastaza, i na štakorima s umjetno izazvanim metastazama karcinoma debelog crijeva u jetri. Antitumorski učinak rezultat je stimulacije imunološkog odgovora domaćina koji se očituje povećanjem težine i broja stanica slezene, aktivnosti NK stanica i T-limfocita. Kemijski sastav biljke C. platycarpos, samo je djelomično poznat iz provedenih općih fitokemijskih i kromatografskih ispitivanja. Svrha i cilj istraživanja je identifikacija i karakterizacija strukture flavonoida i fenolnih kiselina kao biološki aktivnih spojeva, te utvrđivanje bioloških učinaka ekstrakata podlanice u uvjetima in vitro. Za identifikaciju i određivanje sadržaja fenolnih kiselina, flavonoidnih glikozida i flavonoidnih aglikona u njihovom intaktnom obliku u biljnom materijalu, uz optimizaciju ekstrakcijskog postupka, optimirana je i validirana metoda tekućinske kromatografije visoke djelotvornosti obrnutih faza (RP-HPLC) s detektorom s diodnim nizom (DAD). Luteolin-7-O- glukozid je flavonoidni glikozid prisutan u najvećoj količini, a 3-O-kavenoilkina kiselina je fenolna kiselina prisutna u najvećoj količini u biljnom materijalu. Maseni detektor s elektrosprej ionizacijom i ionskom zamkom kao analizatorom, spojen u seriju s fotodiodnim detektorom, korišten je za identifikaciju i karakterizaciju strukture flavonoida i fenolnih kiselina za koje ne postoje komercijalno dostupni standardi. U ovom istraživanju strukturno je karakterizirano i identificirano oko 30 fenolnih komponenata. Izomeri klorogenskih kiselina (CGA) identificirani su na temelju njihovih fragmentacija, UV/VIS spektara i kromatografskih vremena zadržavanja. Rezultati identifikacije i karakterizacije strukture fenolnih kiselina prisutnih u metanolnom ekstraktu biljke C. platycarpos pokazali su prisutnost izomera kavenoilkina kiselina, dikavenoilkina kiselina, feruloilkina kiselina i izomera p-kumaroilkina kiselina. Preparativnom tankoslojnom kromatografijom iz biljnog materijala izolirano je 5 flavonoidnih glikozida. Primjenom UV/VIS spektrofotometrije, spektrometrije masa, 1H NMR, 13C NMR i IR spektroskopskim metodama karakterizacije strukture flavonoidnih glikozida potvrđena je prisutnost luteolin-7-O-rutinozida, krizoeriol-7-O-rutinozida, apigenin-7-O- rutinozida, luteolin-7-O-glukozida i apigenin-7-O- glukozida. Za standardizaciju biljke na sadržaj flavonoidnih aglikona optimiran je postupak ekstrakcije i hidrolize, te je optimirana i validirana metoda tekućinske kromatografije visoke djelotvornosti s fotodiodnim detektorom i masenim detektorom spojenim u seriju za identifikaciju i kvantifikaciju flavonoidnih aglikona i jednostavnih fenolnih kiselina nakon hidrolize glikozida i estera fenolnih kiselina. Najveći broj glikozida u intaktnom biljnom materijalu sadrži luteolin kao aglikon, a zatim slijedi kvercetin. Od jednostavnih fenolnih kiselina nakon hidrolize najzastupljenija je kavena kiselina. Dodatno je dokazana prisutnost i određen sadržaj ukupnih polifenola, polifenola neadsorbiranih na kožni prašak i trjeslovina. Za procjenu sadržaja ukupnih flavonoida i fenolnih kiselina optimirane su i validirane UV/VIS spektrofotometrijske metode. Rezultati kvantifikacije potvrđuju opravdanost primjene UV/VIS postupaka za procjenu sadržaja glavnih fenolnih sastavnica, ali se za dobivanje pouzdanijih podataka o sastavu flavonoida i fenolnih kiselina predlaže primjena HPLC metoda. Ekstraktima podlanice različite polarnosti primjenom DPPH testa, testa neenzimske peroksidacije lipida, deoksiriboza testa, ksantin oksidaza testa, testa sposobnosti neutralizacije superoksidnih radikala, reduktivne sposobnosti Fe(III) iona i kompleksacijske sposobnosti Fe(II) iona, procijenjeno je antioksidativno djelovanje. Citotoksični učinak ekstrakata podlanice ispitan je na staničnim linijama ljudskih leukemijskih stanica u uvjetima in vitro.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Farmacija

POVEZANOST RADA