Naslov
Analize promjena gena CTNNB1 i APC u metastazama mozga
(Analysisof CTNNB1 and APC gene changes in brain metastases)

Autori
Majić, Željka

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad

Fakultet
Prirodoslovno - matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
09.07

Godina
2009

Stranica
34

Mentor
Pećina-Šlaus, Nives ; Weygand-Đurašević, Ivana

Ključne riječi
CTNNB1 ; gen APC ; gubitak hetrozigotnosti ; heterodupleks analiza ; metastaze
(CTNNB1 ; APC gene ; loss of heterozygosity ; heteroduplex analysis ; brain)

Sažetak
Signalni put Wnt uključuje mnoge komponente, a kao najbitnije izdvajaju se CTNNB1 (ß-katenin), APC (adenomatozna polipoza kolona), E-kadherin, aksin, GSK3-ß i c-myc. Wnt sudjeluje u embrionalnom razvoju živčanog sustava, a učestalo je promijenjen u raznim tumorima, pa tako i u tumorima mozga. CTNNB1 ima ključnu ulogu u Wnt signalnom putu, dok APC djeluje kao negativni regulator puta i bitna je komponenta u razgradnji ß-katenina. Cilj ovog rada je analiza genskih promjena komponenata signalnog puta Wnt, ß-katenina i APC u 18 uzoraka metastaza mozga čovjeka. Analiziran je ekson 3 CTNNB1 (hot spot za mutacije u tom genu) i ekson 15 APC, koji sadrži oko 75 % kodirajuće sekvence proteina APC. Lančana reakcija polimeraze (PCR) korištena je za umnažanje fragmenata DNA izoliranih iz tumora mozga i pripadnih kontrolnih uzoraka (DNA iz krvi). Prisutnost mutacija u genu CTNNB1/ekson 3 utvrđivana je heterodupleks analizom (HA) na GMA (gene mutation analysis) gelovima. Za određivanje gubitka heterozigotnosti (LOH) i genske nejednakosti alela APC korištena je metoda polimorfizma dužine restikcijskih odsječaka (RFLP) i restrikcijska endonukleaza Msp I. Niti u jednom od 18 analiziranih uzoraka metastaza nije pronađena mutacija u CTNNB1/ekson 3. 36, 4 % informativnih uzoraka pokazivalo je gubitak heterozigotnosti gena APC, a u uzorku 3 T pronađena je i nova točkasta mutacija u tom genu.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti

POVEZANOST RADA