Naslov
Transgenične stanice ovarija kineskog hrčka (CHO) koje eksprimiraju gen za apurinsku/apirimidinsku endonukleazu kvasca (APN1) otpornije su na spojeve koji oštećuju DNA
(Transgenic Chinese hamster ovary (CHO) cells expressing the yeast apurinic/apyrimidinic endonuclease gene (APN1) are more resistant to DNA damaging agents)

Autori
Tomičić, Maja ; Franekić, Jasna ; Kaina, Bernd

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Radovi u zbornicima skupova, cjeloviti rad (in extenso), znanstveni

Izvornik
Zbornik sažetaka priopćenja / Huber, Đuro - Zagreb, 1997, 379-380

Skup
Šesti kongres biologa Hrvatske

Mjesto i datum
Opatija, Hrvatska, 22.09.1997. - 26.09.1997

Vrsta sudjelovanja
Predavanje

Vrsta recenzije
Domaća recenzija

Ključne riječi
CHO stanice; kvasac; APN1 endonukleaza; ekscizijski popravak
(CHO cells; yeast; APN1 endonuclease; excision repair)

Sažetak
Enzimi uključeni u isijecanje mjesta s gubitkom baze (AP mjesta), nastalih spontano ili alkilacijom/oksidacijom u DNA, su apurinske/apirimidinske (AP) endonukleaze. U popravku sudjeluju usklađeno s još najmanje četiri druga enzima. Da bi uvidjeli biološki značaj AP endonukleaza u zaštiti stanica sisavaca na genotoksične spojeve, konstruirali smo nekoliko stabilnih transfektanata stanica kineskog hrčka (CHO-9) koji eksprimiraju ili gen za AP endonukleazu kvasca (APN1) ili cDNA za humanu Ap endonukleazu (APE) te usporedili učinke njihove ekspresije obzirom na citotoksičnost i stvaranje kromosomskih aberacija. Provedene transfekcije bile su kotransfekcije s plazmidima pCMVT7-APE + pSV2neo i/ili pCMVT7-APN1 + pSV2neo. Iako je APE cDNA bila značajno eksprimirana na razini RNA i proteina, enzimska aktivnost nuklearnih ekstrakta CHO-9-APE transfektanata bila je jednaka aktivnosti kontrolne stanične linije, transficirane samo s pSV2neo. Poput kontrole, ti su transfektanti bili osjetljivi na citotoksični i klastogeni učinak metil-metansulfonata i vodikovog peroksida. Suprotno tome, CHO-9-APN1 transfektanti eksprimirali su višu AP endonukleazunu aktivnost in vitro i reagirali znatno otpornije na korištene mutagene. Iz dobivenih rezultata moguće je izvući nekoliko zaključaka: i) kapacitet ekscizijskog popravka i otpornost na mutagene mogu se pojačati ekspresijom APN1 gena kvasca, (ii) pojačani popravak AP mjesta štiti CHO stanice od različitih skupina mutagena i (iii) Ap mjesta nisu samo citotoksična, već i klastogena oštećenja.

Izvorni jezik
Hrvatski

POVEZANOST RADA