Naslov
Utjecaj PCR inhibitora na molekularnu dijagnostiku pneumokokne pneumonije
(Influence of PCR inhibitors on molecular diagnosis of pneumococcal pneumonia)

Autori
Mareković, Ivana ; Plečko, Vanda ; Boras, Zagorka ; Pavlović, Ladislav ; Budimir, Ana ; Bošnjak, Zrinka ; Kamauf-Balabanić, Blanka ; Marinković, Sonja ; Žele-Starčević, Lidija ; Kalenić, Smilja

Izvornik
Medicina (0025-7680) 44 (2008), 34; 297-302

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Radovi u časopisima, članak, znanstveni

Ključne riječi
bronhoalveolarni ispirak (BAL) ; inhibicija ; izvanbolnička pneumonija ; krv ; PCR
(blood ; bronchoalveolar lavage (BAL) ; community-acquired pneumonia ; inhibition ; PCR)

Sažetak
Cilj: Utvrditi utjecaj inhibitora prisutnih u uzorcima krvi i njenih frakcija te u uzorcima iz respiratornog sustava na rezultate PCR-a za Streptococcus pneumoniae u bolesnika s izvanbolničkom pneumonijom. Ispitanici i metode: U istraživanje je bilo uključeno 80 ispitanika s izvanbolničkom pneumonijom u kojih je, osim konvencionalnih mikrobioloških pretraga, napravljena i lančana reakcija polimeraze (engl. polymerase chain reaction, PCR) za fragment gena pneumolizina na uzorcima seruma (N=77) i bronhoalveolarnih ispiraka (BAL) (N=19). U uzorcima je utvrđivana prisutnost PCR inhibitora, a za njihovo uklanjanje korišteno je razrjeđivanje uzoraka. Rezultati: Primijenjenim mikrobiološkim metodama S. pneumoniae dokazan je kod ukupno 25 (31, 3 %) ispitanika s izvanbolničkom pneumonijom. PCR rezultati u svih 77 uzoraka seruma bili su negativni, a prisutnost PCR inhibitora utvrđena je u jednom uzorku seruma. PCR je u uzorcima BAL-a bio pozitivan kod tri ispitanika, a inhibitori nisu utvrđeni niti u jednom uzorku BAL-a. Rasprava: Pri planiranju i izvođenju PCR-a na kliničkim uzorcima treba misliti na moguću prisutnost PCR inhibitora koji mogu biti uzrok lažno-negativnih rezultata. Određenim postupcima PCR inhibitori mogu se ukloniti iz kliničkih uzoraka ili se njihovo djelovanje može umanjiti (metoda izolacije DNA, optimizacija uvjeta umnažanja, razrjeđivanje uzoraka). Prisutnost inhibitora u uzorku može se utvrditi dodavanjem interne kontrole u svaki uzorak ili pomoću spikinga. Zaključak: S obzirom na to da je u ovom istraživanju prisutnost inhibitora utvrđena samo u jednom uzorku seruma, može se zaključiti da PCR inhibitori u uzorcima seruma i BAL-a ne utječu na rezultate PCR-a za S. pneumoniae u bolesnika s izvanbolničkom pneumonijom.

Izvorni jezik
Hrvatski

POVEZANOST RADA