Naslov
OPTIMIRANJE PROIZVODNJE BIOMASE ŽIVOTINJSKIH STANICA U BIOREAKTORIMA
(OPTIMIZATION OF ANIMAL CELL BIOMASS PRODUCTION IN BIOREACTORS)

Autori
Slivac, Igor

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Prehrambeno-biotehnološki fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
30.09

Godina
2008

Stranica
122

Mentor
Kniewald, Zlatko

Ključne riječi
BHK-21 [C-13]; CCO; Wave bioreaktor; Cell-spin bioreaktor; mikronosači
(BHK-21 [C-13]; CCO; Wave bioreactor; Cell-spin bioreactor; microcarriers)

Sažetak
Primjena kulture životinjskih stanica od osobitog je značenja za učinkovitu bioprocesnu proizvodnju različitih terapeutskih proteina kao i za fundamentalna laboratorijska istraživanja. Danas postoji niz kultivacijskih sustava pomoću kojih se uspješno mogu uzgajati sve vrste uspostavljenih staničnih linija. U ovom radu opisana je proizvodnja stanične biomase suspenzijskih BHK-21 [C-13] i adherentnih CCO stanica u Wave i Cell-spin bioreaktoru. U oba bioreaktora uzgoj BHK-21 [C-13] stanica proveden je kao šaržni postupak i ponavljajući šaržni postupak s izmjenom medija. Veća brzina rasta i konačna koncentracija stanica postignuti su u Wave bioreaktoru. U nastavku istraživanja, utvrđeni parametri vođenja procesa u Wave bioreaktoru iskorišteni su za proizvodnju virusnih čestica bolesti Aujeszkoga. U multiwell pločama istraživan je rast i utrošak sastojaka iz hranjivog medija CCO stanica. Ustanovljeno je da je glavni izvor energije stanicama glutamin i još nekoliko drugih aminokiselina. Za kultivaciju adherentnih CCO stanica u bioreaktorima korištena su dva tipa mikronosača: glatki Cytodex 1 i porozni Cytoline 1. Zbog bržeg rasta stanica u njemu, Wave bioreaktor se pokazao boljim za uzgoj stanične kulture na Cytodex 1 mikronosačima od Cell-spin bioreaktora. Dodatak tek aktiviranih mikronosača u bioreaktor sa skoro obraslim mikronosačima uz istovremeni prijelaz sa stalnog na povremeno miješanje, može poslužiti kao učinkovit postupak supkultiviranje jer pritom dolazi do pojave prelaska stanica s obraslih na naknadno dodane mikronosače. Također, istražena je mogućnost ponovne uporabe Cytodex 1 mikronosača za uzgoj CCO stanica. Brzina prihvaćanja i rasta stanica na već rabljenim mikronosačima pokazale su se jednakim onima na novim mikronosačima. Porozni Cytoline 1 mikronosači iskorišteni su za vrlo ekonomičan i djelotvoran postupak proizvodnje stanične biomase u bioreaktorima. Stanice koje zaostanu u porama mikronosača nakon obrade tripsinom poslužile su kao inokulum za nastavak ili započinjanje novog procesa s istim mikronosačima.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biotehnologija

POVEZANOST RADA