Naslov
Konjugacija bakterija Escherichia coli i Streptomyces rimosus
(Escherichia coli - Streptomyces rimosus conjugation)

Autori
Galić, Tatjana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
29.10

Godina
1998

Stranica
64

Mentor
Hranueli, Daslav

Ključne riječi
Escherichia coli; Streptomyces rimosus; konjugacija
(Escherichia coli; Streptomyces rimosus; conjugation)

Sažetak
Restrikcijske analize DNA plazmida pPZG50 su pokazale da enzimi BamHI, ClaI, EcoRI i XhoI cijepaju DNA na mjestima opisanim u literaturi. Restrikcijska endonukleaza PstI, međutim, cijepa plazmidnu DNA, umjesto na tri, na četiri mjesta. Najvjerojatniji razlog tome jest nepreciznost u crtanju restrikcijske mape plazmida pSET152. Konstruirani su donori bakterije E. coli [ET12567 (pUZ8002, pPM927), GM119 (pUZ8002, pPZG50), GM119 (pUZ8002, pPM927) i GM31 (pUZ8002, pPZG50)] za intergeneričke konjugacije sa stanicama vrste S. rimosus. Svi donori sadržavaju ispravne plazmidne DNA. Plazmid pPZG50 može se vrlo uspješno prenositi konjugacijom iz metilacijski deficijentog donora E. coli ET12567 (pUZ8002) u recipijent S. rimosus R6-500 i integrirati se u kromosom domaćina. Nasuprot tome, upotrebom je istog donora, učestalost prijenosa i integracije plazmida pPM927 niža za 104 do 106 puta. Dokazano je da se DNA plazmida pPZG50 integrira u kromosom recipijenta S. rimosus MV11 i MV25W. Ekskonjuganati MV25W-1 - MV25W-3 pokazuju očekivana dva vezna dijela DNA od 25,9 i 13,4 kb, dok se u ekskonjuganata MV11-1 - MV11-3, pored dva vezna dijela DNA iste veličine, pojavljuje i treći dio od 7,3 kb. Taj bi se rezultat mogao objasniti integracijom dimera, a ne monomera, DNA plazmida pPZG50 što bi bilo ovisno o soju recipijentu. Prijenos i integracija plazmida pPZG50 i pPM927 u recipijent S. rimosus R6-500 moguća je samo ako se kao donor upotrijebi bakterijski soj [E. coli ET12567 (pUZ8002)] trostruko mutiran u genima odgovornim za metilaciju DNA (hsdM, dam, dcm). U ostalih su kombinacija donora i recipijenta ekskonjuganti dobiveni samo u križanju GM31 (pUZ8002, pPZG50) x S. lividans 1326 i to s najnižom učestalošću koju je, u ovim uvjetima, moguće otkriti.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Prehrambena tehnologija

POVEZANOST RADA