Naslov
Identifikacija papilomavirusa u dugogodišnje pohranjenim kondilomima metodom lančane reakcije polimerazom
(PCR detection of HPV infection in archival specimens of condiloma)

Autori
Babić, Ana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
11.06

Godina
1999

Stranica
40

Mentor
Pavelić, Krešimir

Neposredni voditelj
Grce, Magdalena

Ključne riječi
HPV; PCR; kondilomi
(HPV; PCR; condiloma)

Sažetak
Papilomavirusi čovjeka (HPV) posljednjih se godina intenzivno istražuju zbog povezanosti s raznim bolestima kože i spolnog sustava od kojih su neke čak zloćudne. Poznato je iz dosadašnjih istraživanja da su u kondilomima prisutni HPV tipovi 6 i 11, a da su HPV tipovi 16 i 18 najčešće povezani s oštećenjima genitalnog epitela, pretečama karcinoma. Cilj ovog rada bio je utvrditi prisutnost HPV i odrediti tip virusa u kondilomima koji su bili dugo godina zamrznuti (10 godina). Naime, pripremiti DNA iz takvih arhivskih uzoraka prvobitni je cilj, a zatim provjeriti da li je takav materijal još uvijek pogodan za detekciju HPV , etodom lančane reakcije polimerazom (PCR). U istraživanju koristili smo klasičnu metodu fenol/kloroform te precipitaciju etanolom za izolaciju DNA. Količina DNA u pohranjenim uzorcima bila je zadovoljavajuća, a istraživanja kvalitete pokazala su da je DNA zbog dugogodišnje pohrane u velikoj mjeri fragmentirana. Metodu PCR uz korištenje zajedničkih i tip-specifičnih početnica koristili smo za detekciju i genotipizaciju HPV kao i metodu cijepanja produkata reakcije PCR restrikcijskim enzimima (RFLP). Od 23 uzorka 20 ih je bilo pogodno za analizu metodom PCR, dok u tri uzorka to nije bilo moguće, vjerojatno zbog stupnja razgradnje DNA. U svih 20 uzoraka bila je prisutna DNA HPV (100%). Od toga je HPV 6 zastupljen u 45% uzoraka, HPV 11 u 15% uzoraka, HPV 16 u 10% uzoraka, a kod 35% uzoraka nismo odredili tip HPV. U jednom uzorku istovremeno su bili prisutni HPV 11 i HPV 16. Obzirom na dobivene rezultate može se zaključiti da je DNA iz dugogodišnje pohranjenih uzoraka uglavnom pogodna za analizu DNA HPV metodom PCR.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti

POVEZANOST RADA