Naslov
Metil-transferaza Sgm: optimiranje ekspresije u različitim sojevima bakterije Escherichia coli
(Methyltransferase Sgm: optimisation of gene expression in different strains of Escherichia coli)

Autori
Čeko, Ivana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
03.07

Godina
2008

Stranica
53

Mentor
Maravić Vlahoviček, Gordana

Ključne riječi
antibiotici; rezistencija; aminoglikozidi; metil-transferaza Sgm
(antibiotics; resistance; aminoglycosides; methyltransferase Sgm)

Sažetak
Antibiotici su selektivno toksični kemijski spojevi, prvotno otkriveni kao metaboliti raznih gljivica i bakterija. Oni napadaju stanične strukture koje nisu prisutne u domaćinu ili su prisutne u drugom obliku, a ciljni patogeni su najčešće bakterije. Među najčešće korištene antibiotike ubrajamo aminoglikozide koji inhibiraju sintezu proteina. Ireverzibilno se vežu na 16S rRNA male podjedinice prokariotskog ribosoma, uzrokuju pogrešno čitanje mRNA, proizvodnju nefunkcionalnog proteina i lizu stanice. Bakterije proizvođači aminoglikozidnih antibiotika imaju mehanizam zaštite protiv vlastitog metabolita. One posjeduju metilaze iz porodice Arm (Aminoglycoside resistance methyltransferase) koje metiliraju specifične baze u mjestu vezanja na ribosom i tako sprečavaju vezanje antibiotika na ribosom. U posljednje vrijeme su metilaze iz porodice Arm primjećene u sve većem broju patogenih bakterija zbog vrlo brzog horizontalnog prijenosa gena. Predmet istraživanja je metil-transferaza Sgm iz bakterije Micromonospora zionensis. Cilj rada je optimiranje ekspresije u različitim sojevima bakterije Escherichia coli, kako bi se dobilo što više topljivog proteina Sgm za buduća istraživanja. Sojevi Rosetta(DE3)pLacI, Tuner(DE3)pLacI i ER2566 transformirani su rekombinantnim vektorom pET-25b(+)-Sgm-His koji nosi gen za metil-transferazu Sgm. Ekspresija je inducirana s dodatkom izopropil-beta-D-tiogalaktozida. Iskušavanjem dvaju različitih koncentracija induktora pri uzgoju na temperaturi od 30°C nastojalo se utjecati na intenzitet ekspresije te količinu i svojstva dobivenog proteina. Raspravljeni su ciljevi budućih istraživanja, a ovaj rad je korak u nizu studija čiji je cilj rasvjetljavanje strukture i funkcije metil-transferaze Sgm.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA