Naslov
Određivanje humane serumske holinesteraze enzim-antigen imuno testom (EAIT)
(Determination of human serum cholinesterase by enzyme-antigen immuno assay (EAIA))

Autori
Agger, Ralf ; Norgaard-Pedersen, Bent ; Šimaga, Šumski

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Sažeci sa skupova, sažetak, znanstveni

Izvornik
Program/Popis autora/Knjiga sažetaka / - , 1985, 180/R8-270

Skup
1.Kongres imunologa Jugoslavije

Mjesto i datum
Opatija, Hrvatska, 21.10.1985. - 25.10.1985

Vrsta sudjelovanja
Poster

Vrsta recenzije
Domaća recenzija

Ključne riječi
Humana serum holinesteraza; enzim antigen imuno test
(Human serum cholinesterase; enzyme antigen immuno assay)

Sažetak
Humana serumska holinesteraza (EC 3.1.1.8) je enzim koji hidrolizira estere holina. Sintetizira se u jetri i krvlju raznosi u ostala tkiva i tjelesne tekućine. Fiziološka uloga serumske holinesteraze nije sasvim razjašnjena no snižena aktivnost ovog enzima prati određena patološka stanja organizma izazvana jetrenim i drugim oboljenjima, izvjesnim drogama i hormonima, te trovanjem organo-fosfornim spojevima, i neposredan je uzrok abnormalno produženog zastoja disanja koji se javlja pri anesteziji nekih pacijenata nakon primjene neuromuskularnog relaksanta, sukcinil holina. Idealna metoda za određivanje serumske holinesteraze upotrebljiva u kliničkoj i preventivnoj dijagnostici, toksikologiji i sudskoj medicini, trebala bi biti jednostavna, brza, pouzdana, osjetljiva i specifična. Enzimski imuno testovi svojim karakteristikama najbliži su navedenim zahtjevima, pa je u tom smislu razvijen heterogeni enzim-antigen imuno test (EAIT) za određivanje i karakterizaciju serumske holinesteraze. Princip metode sastoji se u mjerenju signala kojeg proizvodi enzim, koji je ujedno i antigen, kad se veže na specifična poliklonalna ili monoklonalna antitijela adsorbirana na plastičnu podlogu. Imunoglobulinska frakcija s poliklonalnim antitijelima specifičnim za holinesterazu, dobivena je frakcionim taloženjem kunićevog antiseruma s amonijevim sulfatom, te kromatografijom na DEAE-Sephadexu A 50. Monoklonalna antitijela protiv holinesteraze proizvedena su standardnom procedurom fuzije stanica slezene imuniziranih BALB/c miševa i mieloma linije (X63-Ag 8.6.5.3), te imunopurifikacijom ascitne tekućine. Optimizirani test upotrijebljen je za rutinsko određivanje i karakterizaciju humane serumske holinesteraze, a dobiveni rezultati u skladu su s njegovim očekivanim karakteristikama.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kliničke medicinske znanosti

POVEZANOST RADA