Pregled bibliografske jedinice broj: 319137
Određivanje slijeda nukleotida u molekuli DNA Sangerovom dideoksi metodom
Određivanje slijeda nukleotida u molekuli DNA Sangerovom dideoksi metodom // Metode u molekularnoj biologiji / Ambriović Ristov, Andreja ; Brozović, Anamaria ; Bruvo Mađarić, Branka ; Ćetković, Helena ; Herak Bosnar, Maja ; Hranilović, Dubravka ; Katušić Hećimović, Silva ; Meštrović Radan, Nevenka ; Mihaljević, Snježana ; Slade, Neda ; Vujaklija, Dušica (ur.).
Zagreb: Institut Ruđer Bošković, 2007. str. 475-491
CROSBI ID: 319137 Za ispravke kontaktirajte CROSBI podršku putem web obrasca
Naslov
Određivanje slijeda nukleotida u molekuli DNA Sangerovom dideoksi metodom
(Sanger Method of DNA Sequencing)
Autori
Ćetković, Helena
Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Poglavlja u knjigama, stručni
Knjiga
Metode u molekularnoj biologiji
Urednik/ci
Ambriović Ristov, Andreja ; Brozović, Anamaria ; Bruvo Mađarić, Branka ; Ćetković, Helena ; Herak Bosnar, Maja ; Hranilović, Dubravka ; Katušić Hećimović, Silva ; Meštrović Radan, Nevenka ; Mihaljević, Snježana ; Slade, Neda ; Vujaklija, Dušica
Izdavač
Institut Ruđer Bošković
Grad
Zagreb
Godina
2007
Raspon stranica
475-491
ISBN
978-953-6690-72-5
Ključne riječi
određivanje slijeda nukleotida
(sequencing)
Sažetak
1977. godine Fred Sanger sa suradnicima na Sveučilištu u Cambridgeu razvio je metodu koja se zasniva na zaustavljanju enzimatske sinteze lanca DNA ugradnjom analoga nukleotida (dideosiribonukleozid-trifosfata), pa se ova metoda još naziva i enzimatska metoda.Osnovna načela određivanja slijeda nukleotida u DNA nisu se promjenila od tada. Metoda je doživjela samo manje preinake i usavršavanja. Razvoj instrumentacije, te automatizacija i kompjuterizacija procesa omogućili su daleko veću točnost i efikasnost u radu. Prirodni supstrati za sintezu DNA su nukleotidi. Enzimi koji sintetiziraju DNA mogu ugraditi u rastući lanac i analoge nukleotida, uzrokujući zaustavljanja daljnje sinteze DNA lanca. Svaki analog nukleotida obilježen je drugom fluorescencijskom bojom. Na kraju reakcije nastaje smjesa fragmenata DNA koji se razlikuju dužinom samo za jedan nukleotid. Tijekom elektroforeze fluorescentno obilježeni fragmenti putuju u okomito postavljenom gelu. Detekcija se provodi sustavom koji uključuje laserski čitač. Signali se automatski pohranjuju i kompjuterski obrađuju. "DNA-sekvenator" je uređaj kojim se određuje slijed nukleotida u molekuli DNA. Najnoviju generaciju "DNA-sekvenatora" predstavlja kapilarni tip instrumenta velikog kapaciteta. Ovakvi instrumenti u sve su većoj mjeri automatizirani i koriste "četverobojnu" biokemiju.
Izvorni jezik
Hrvatski
Znanstvena područja
Biologija
POVEZANOST RADA
Projekti:
098-0982913-2874 - Geni i genomi: struktura, funkcija i evolucija (Ćetković, Helena, MZOS ) ( CroRIS)
Ustanove:
Institut "Ruđer Bošković", Zagreb
