Naslov
Praćenje razvoja nove kosti pomoću transgeničnih miševa s vizualnim biljezima diferencijacije osteoblasta
(Studiing new bone formation using transgenic mice with visual markers of osteoblast differentiation)

Autori
Bilić-Čurčić, Ines

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Medicinski fakultet

Mjesto
Osijek

Datum
28.11

Godina
2006

Stranica
99

Mentor
Tucak, Antun

Neposredni voditelj
Kalajzić, Ivo

Ključne riječi
zelena fluorescenta bjelančevina (GFP) ; promotor gena osteokalcina ; promotor kolagena tipa 1 ; Tie2 promotor ; heterotopična koštana formacija ; diferencijacija stanica osteoblastne loze
(green flourescent protein (GFP) ; osteocalcin promoter ; Tie2 promoter ; type 1 collagen promoter ; heterotopic bone formation ; osteoblast differentiation)

Sažetak
Cilj istraživanja: Analizirati heterogenost osteoblastične loze pomoću humanog osteokalcinskog promotora i štakorskog kolagen tip1a1 promotora vezanih s vizualno različitim GFP varijantama, topazom i cyan-om. Drugi cilj je predstaviti model heterotopične implantacije koji korist FGF2 proširenu populaciju stanica koštane srži (BMSC) izoliranih iz Tie2eGFP (endotelni biljeg) i pOBCol3.6GFPcyan i topaz (biljeg preosteoblasta) transgeničnih miševa da bismo ocijenili primatelj/davatelj vezu među stanicama koje sudjeluju u procesu heterotopične koštane formacije. Nacrt studije: Učiniti analizu histoloških rezova kosti, te BMSC i mCOB kultura dobivenih iz križanih transgeničnih mišjih linija pOBCol3.6GFPcyan X hOC-GFPtpz. Drugi dio studije uključuje različite kombinacije Tie2eGFP, pOBCol3.6GFPcyan/topaz transgeničnih životinja kao donora stromalnih stanica (BMSC), kompletne koštane srži (KKS), te kao domaćina. Kolagen izoliran iz repa štakora korišten je kao nosač donorskih stanica, a implantacija je učinjena u letalno ozračenom mišu spašenom KKS injekcijom. 4-5 tjedana nakon totalnog ozračenja tijela (TOT) razvila se dobro formirana kost s koštanom srži. Rezultati: Tri različita uzorka dvostruke ekspresije transgena opažaju se u staničnim koštanim kulturama i u histološkim rezovima kosti. Naši rezultati podržavaju interpretaciju da je jaki izražaj pOBCol3.6GFPcyan biljega smješten u novostvorenim osteoblastima, dok je istovremeni jaki izražaj pOBCol3.6GFPcyan i hOC-GFPtpz transgena vidljiv u osteoblastima koji aktivno proizvode matriks. Osteoblasti s jakim izražajem hOC-GFPtpz i slabim pOBCol3.6GFPcyan također su prisutni, te mogu, ali i ne moraju proizvoditi mineralizirani matriks. Eksperimenti heterotopične koštane formacije pokazuju dominaciju stanica poteklih od donora u stvaranju endotela krvnih žila kao i u stvaranju nove kosti u implantatu. Nadalje, obložne stanice na endostealnoj površini novostvorene koštane srži potekle su od KKS donora ili domaćina. Zaključak: Ovaj složeni pristup otkriva heterogenost unutar populacije zrelih osteoblasta, koju ne možemo otkriti sadašnjim histološkim metodama, te bi mogao biti koristan kod identificiranja i izoliranja populacija stanica osteoblastične loze u različitim stadijima diferencijacije. U modelu stvaranja heterotopične kosti FGF2 proširene stromalne stanice koštane srži su izvor endotelnih i osteogenih progenitorskih stanica sposobnih za stvaranje nove kosti neovisno o domaćinu. Ovaj će model biti koristan za razumijevanje interakcija između ova dva stanična tipa koji kontroliraju osteoblastičnu diferencijaciju in vivo.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti

POVEZANOST RADA