Naslov
KARAKTERIZACIJA REKOMBINANTNOG PROTEINA SPEKTROSKOPSKIM METODAMA I SPEKTROMETRIJOM MASA
(CHARACTERISATION OF RECOMBINANT PROTEIN BY SPECTROSCOPIC METHODS AND MASS SPECTROMETRY)

Autori
Galić, Nives ; Peić, Ariana ; Meić, Zlatko ; Cindrić, Mario

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Sažeci sa skupova, sažetak, znanstveni

Izvornik
Knjiga sažetaka, XIX HRVATSKI SKUP KEMIČARA I KEMIJSKIH INŽENJERA, Opatija / - , 2005

Skup
XIX HRVATSKI SKUP KEMIČARA I KEMIJSKIH INŽENJERA

Mjesto i datum
Opatija, Hrvatska, 24.04.2005. - 27.04.2005

Vrsta sudjelovanja
Poster

Vrsta recenzije
Nije recenziran

Ključne riječi
-

Sažetak
Sveučilište u Zagrebu, Strossmayerov trg 14, Zagreb, Hrvatska 2Pliva-Istraživanje i razvoj, Prilaz baruna Filipovića 29, Zagreb, Hrvatska Rekombinantni protein rHuINF _-2b visoke čistoće (98 %) i očuvanosti proučavan je spektroskopskim metodama i spektrometrijom masa kao modelni sustav za karakterizaciju cijele skupine proteina koji djeluju na rad imunog sustava. Analizom intaktne molekule interferona _-2b metodom cirkularnog dikroizma naden je udio _-uzvojnice _d 56 %. Metodom fluorescencijske spektroskopije promatrane su konformacijske promjene proteina u ovisnosti o pH vrijednosti otopine i koncentraciji denaturanta gvanidin-hidroklorida. Protein rHuINF _-2b pobuđen pri 280 nm emitira zračenje pri 340 nm što odgovara fluorescenciji triptofana smještenog na površini proteina. Fluorescencija fenilalanina i tirozina nije uočena. Spektrometrijom masa analizirani su triptički fragmenti proteina rHuINF _-2b. Uradu je korišten instrument MALDI-TOF uz reflektron. Analizom triptičkih fragmenata potvrđeno je 95 % aminokiselinskog slijeda u rHuINF _-2b. Redoslijed nastajanja triptičkih fragmenata praćen je u određenim vremenskim intervalima. Prema rezultatima digestije in silico kao pogodne za cijepanje rHuINF _-2b odabrane su uz tripsin proteinaze Glu-C te Lys-C. Analizom proteina nakon cijepanja s ove dvije proteinaze

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kemija

POVEZANOST RADA