Naslov
Proteini stanične stijenke kvasca Saccharomyces cerevisiae: mehanizam ugradnje u stijenku i moguće fiziološke funkcije
(Saccharomyces cerevisiae cell wall proteins: binding to the cell wall and possible physiological functions)

Autori
Teparić, Renata

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Prehrambeno-biotehnološki fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
21.04

Godina
2005

Stranica
99

Mentor
Mrša, Vladimir

Ključne riječi
Ccw5p; PIR proteini; proteini stijenke kvasca; Scw proteini; stanična stijenka kvasca
(Ccw5p; cell wall proteins; PIR proteins; Scw proteins; yeast cell wall)

Sažetak
U radu su provedeni eksperimenti kojima se nastojalo doći do saznanja o načinu povezivanja proteina PIR porodice stanične stijenke kvasca Saccharomyces cerevisiae sa strukturnim komponentama stijenke. Svi proteini PIR porodice kao zajedničku strukturnu karakteristiku sadrže tzv. ˝ponavljajuću sekvencu˝, a kao modelni protein korišten je Ccw5p/Pir4p koji sadrži dvije kopije ove sekvence. Ustanovljeno je da je za vezanje Ccw5p proteina u stijenku neophodna bar jedna kopija ˝ponavljajuće sekvence˝ i nativna konformacija proteina. U radu je nadalje ispitivana sposobnost ugradnje proteina Ccw5p iz okolnog medija u stijenke cijelih stanica tijekom uzgoja kvasca. Stanice pir i scw mutanata mogu vezati Ccw5p iz okolnog medija, dok izolirane stanične stijenke nemaju tu sposobnost što pokazuje da je za vezanje Ccw5p proteina potrebna određena fiziološka aktivnost stanica. Mogućnost ugradnje Ccw5p proteina iz okolnog medija u stijenke ovisi o čimbenicima koji dovode do promjena u strukturi stanične stijenke. Efikasnost vezanja se povećava ukoliko se stanice uzgajaju u uvjetima povećanog osmotskog pritiska. Za razliku od ostalih Scw proteina, kao i proteina PIR porodice, čiji nedostatak dovodi do pojačane ugradnje Ccw5p u stijenku, nedostatak Scw11p proteina ima suprotni učinak. Međutim, u in vivo uvjetima niti nedostatak Scw11p proteina niti povišeni osmotski pritisak nemaju značajnijeg efekta na ugradnju proteina PIR porodice u staničnu stijenku, pa se može zaključiti da vezanje Ccw5p iz medija ovisi o nekim čimbenicima koji ne utječu na vezanje ovog proteina u nativnim uvjetima. Ispitivanjem morfoloških karakteristika mutanata na razini pojedinačnih stanica uočeno je znatno smanjenje osmotske stabilnosti stanica višestrukih ccw/pir mutanata, pogotovo u stacionarnoj fazi rasta dok, s druge strane, osmotska stabilnost stanica scw mutanata nije znatnije narušena, pa se može pretpostaviti da PIR proteini imaju i određenu ulogu u održavanju osmotske stabilnosti stanica. Ovi rezultati upućuju na zaključak da proteini PIR porodice imaju međusobno sinergističke funkcije, koje su različite od funkcija Scw proteina. Stanice višestrukih ccw/pir mutanata rastu u nakupinama uslijed nekovalentnih interakcija među stanicama te pokazuju karakterističan fenotip koji se očituje u postojanju dviju stanice kćeri na jednoj stanici majci. Nedostatak PIR proteina ne utječe na odabir mjesta nastanka novog pupa, niti na raspodjelu genetskog materijala između stanice majke i kćeri, već je ova pojava posljedica defekta u procesu odvajanja stanice kćeri od stanice majke.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biotehnologija

POVEZANOST RADA