Naslov
INHIBICIJA PROKARIOTSKIH I EUKARIOTSKIH AMINOACIL-tRNA-SINTETAZA ANALOZIMA SERINA
(INHIBITION OF PROKARYOTIC AND EUKARYOTIC SERYL-tRNA SYNTHETASES WITH SERINE ANALOGUES)

Autori
Slade, Dea

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
05.07

Godina
2004

Stranica
88

Mentor
Weygand-Đurašević, Ivana

Neposredni voditelj
Korenčić, Dragana

Ključne riječi
sinteza proteina; seril-tRNA-sintetaza; Escherichia coli; Escherichia coli; analozi serina; enzimska kinetika; inhibicija
(protein synthesis; inhibition)

Sažetak
Seril-tRNA-sintetaze (SerRS) kataliziraju vezanje serina za pripadnu tRNA kao ključni korak u biosintezi proteina. Zbog svoje esencijalne uloge u staničnom rastu predstavljaju ciljne molekule za razvoj nove skupine antibiotika kao potencijalnog rješenja problema porasta rezistencije mikroorganizama na postojeće antibiotike. Razlike u primarnom slijedu i strukturi aktivnog mjesta patogenih i domaćinskih sintetaza čine osnovu za "dizajniranje" inhibitora koji su specifični za patogeni enzim u obliku analoga supstrata ili reakcijskog intermedijera. U cilju pronalaska analoga serina koji bi selektivno inhibirali bakterijsku sintetazu, istražena je osjetljivost seril-tRNA-sintetaze bakterije Escherichia coli i kvasca Saccharomyces cerevisiae na serin-hidroksamat, serin-amid i serin-metilester. Enzim bakterije E. coli dobiven je kloniranjem gena serS u vektor pET15b, ekspresijom SerRS s histidinskim repom i pročišćavanjem pomoću afinitetne kromatografije. Inhibicijsko djelovanje odabranih analoga utvrđeno je kinetičkom analizom pomoću standardnog aminoacilacijskog testa. Utvrđeno je da sva tri analoga kompetetivno inhibiraju bakterijski i kvaščev enzim. Serin-amid pokazao se najučinkovitijim inhibitorom bakterijskog enzima, dok je kvaščev enzim najosjetljiviji na serin-hidroksamat. Relativna osjetljivost dvaju enzima najznačajnija je u slučaju serin-amida koji je deset puta jače inhibirao bakterijski enzim.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA