Naslov
Zastupljenost citolitičkih i apoptotičkih molekula tijekom normalne trudnoće
(Expression of cytolytic and apoptotic molecules during normal pregnancy)

Autori
Rubeša, Gordana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Medicinski fakultet

Mjesto
Rijeka

Datum
07.02

Godina
1997

Stranica
134

Mentor
Rukavina, Daniel

Ključne riječi
Perforin; Trudnoća; TJ6; CTL; NK
(Perforin; Pregnancy; TJ6; CTL; NK)

Sažetak
Preživljavanje fetusnog alotransplantata ovisi o lokalnim imunoregulacijskim mehanizmima koji su prisutni na spoju majčinih (decidua) i fetalnih (trofoblast) tkiva. Zbog nazočnosti velikog broja stanica koje u svojim granulama sadrže perforin, a nalaze se u decidui, otvara se pitanje uloge citolitičkih mehanizama tijekom normalne trudnoće. Na molekularnoj razini definirana su dva temeljna citolitička mehanizma posredovana: perforinom, odnosno kompleksom Fas ligand-Fas. U ovom radu smo istraživali nazočnost oba mehanizma u decidui i krvi tijekom normalne trudnoće. Nadalje, 1990. godine prvi put je opisan TJ6 protein, kojemu se pripisuju brojne uloge kao što je imunoregulacijska uloga u timusnoj selekciji, efektorska uloga u programiranoj smrti stanica (apoptozi), te funkcionalna uloga u preživljavanju fetalnog alografta tijekom normalne trudnoće u miša. Tako smo uz perforin i Fas-ligand pozitivne stanice, kao citolitičke efektorske stanice, istraživali i prisustvo TJ6 proteina, kao jedne imunoregulacijske ili apoptotičke molekule tijekom normalne trudnoće u čovjeka. Decidua prvog tromjesečja trudnoće obiluje stanicama koje su jedinstvene za ovo tkivo, a nose fenotipsko obilježje CD56+CD16-P+. Limfociti periferne krvi (LPK) tijekom normalne trudnoće mijenjaju fenotipska obilježja. Tako smo uočili porast NK i citotoksičnih limfocita T na termin poroda, u odnosu na prvo tromjesečje trudnoće. I perforin pozitivni limfociti periferne krvi mijenjaju fenotipska obilježja tijekom trudnoće. Tako dominantnu populaciju LPK u prvom tromjesečju trudnoće čine P+ CD56bright+ CD16- stanice (stanice decidualnog fenotipa), dok je na terminu poroda uočena dominacija P+C56dim+ CD16+ LPK (stanice fenotipa negravidnih žena). Istraživanja mehanizama perforinom posredovane citotoksičnosti otežana su zbog problema dugotrajne kultivacije perforin pozitivnih stanica. Zbog toga je jedan od ciljeva naših istraživanja bio utvrditi uvjete za dugotrajniju kultivaciju perforin pozitivnih stanica. Pošto humana decidua obiluje perforin pozitivnim stanicama (42% od svih decidualnih limfocita sadrži perforin), istražili smo mehanizme odgovorne za opstajanje perforina u kulturi decidualnih limfocita. 18-satna kultivacija perforin pozitivnih limfocita periferne krvi negravida, gravida ili decidualnih limfocita uvjetuje dramatičan pad perforin pozitivnih stanica i sadržaja perforina u stanici. Stimulacija perforin pozitivnih limfocita periferne krvi ili decidue prvog tromjesečja trudnoće s anti-CD3 mAt, PHA, rIL-2 ili kombinacijom istih nije uspjela blokirati gubitak perforina u 18-satnoj kulturi. Međutim, kokultivacija limfocita periferne krvi i decidualnih limfocita s decidualnim makrofagima, uspješno prevenira gubitak perforinskih molekula iz stanica koje sadrže perforin. Singenički decidualni makrofagi uz stimulaciju sa pHA induciraju čak i povećanje ekspresije perforina, kako u limfocitima periferne krvi tako i u decidualnim limfocitima. Nestajanje perforina u 18-satnoj kulturi limfocita periferne krvi i decidualnih limfocita popraćeno je istovremenim porastom ekspresije Fas-liganda na površini limfocita periferne krvi i decidualnim limfocitima, koji inače nije prisutan na tim stanicama. TJ6m protein prisutan je na limfocitima periferne krvi i decidualnim limfocitima tijekom prvog tromjesečja normalne trudnoće. Western blot lizat decidualnih limfocita pokazao je da se TJ6m pojavljuje u tri različite molekulske veličine: 67, 60 i 32 KD. Na isti način lizat LPK istih trudnica pokazuje također tri trake u Western blotu od približno 67, 50 i 37 KD. TJ6 postotno je više zastupljen na DL nego na LPK prvog tromjesečja trudnoće. Kultivacija stanica s monoklonskim protutijelom na CD3 molekulu povećava ekspresiju TJ6 molekule na površini LPK. Iz svega prethodno navedenog možemo zaključiti da na dodirnoj plohi majčinih tkiva i fetoplacentne jedinice tijekom normalne trudnoće dolazi do izražavanja i citolitičkih i apoptotičkih molekula. Jedna od citolitičkih molekula, perforin, visoko je zastupljena u decidualnim limfocitima, ali je njihova citolitička aktivnost veoma niska u usporedbi s perforin pozitivnim LPK. Druga citolitička molekula, Fas-ligand, gotovo i nije prisutna tijekom normalne trudnoće. Povećana ekspresija ove molekule viđena je jedino u in vitro uvjetima prilikom smanjenja ekspresije perforina u kulturi decidualnih limfocita. TJ6 protein, kao imunoregulacijska ili apoptotička molekula izražava se na limfocitima periferne krvi, a posebno na decidualnim limfocitima tijekom prvog tromjesečja trudnoće.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kliničke medicinske znanosti

POVEZANOST RADA