Naslov
PAGE proteina na aparaturi PhastSystem
(Electrophoresis on PhastSystem)

Autori
Vukelić, Bojana

Vrsta obrazovnog materijala
Ostalo (nedefinirano)

Izdavač
Institu 'Ruđer Bosković

Grad
Zagreb

Godina
2003

Stranica
29

Ključne riječi
Elektroforeza proteina. Poliakrilamidni gel. Aparatura PhastSystem.
(Electrophoresis. PhastSystem. Polyacrylamide gels.)

Sažetak
Elektroforeza je separacija nabijenih molekula pod utjecajem vanjskog električnog polja. Relativna pokretljivost individualnih molekula ovisi o njihovom naboju, veličini i obliku, te temperaturi i viskoznosti medija kroz koji molekule migriraju. Kompleksne smjese mogu tim procesom biti razdvojene do visoke rezolucije. Elektroforeza bioloških makromolekula provodi se u otopini stabiliziranoj poroznim matriksom (poliakrilamidni ili agarozni gel). PhastSystem omogućuje automatsku elektroforetsku separaciju proteina na pločastim poliakrilamidnim gelovima (5x4, 5 cm) debljine 0, 43 mm. Centralni dio ove aparature čini jedinica za kontrolu i separaciju, sa mikroprocesorom, ugrađenim izvorom struje i termostatiranom horizontalnom pločom - podlogom za elektroforezu. Višestepeno programiranje omogućuje automatsko nanošenje i elektroforetsku separaciju uzoraka. Ovisno o odabranom programu i mediju na kojem se izvodi separacija, na PhastSystemu se može provoditi izoelektrično fokusiranje ili elektroforeza u nativnim ili denaturirajućim uvjetima (SDS-PAGE), u trajanju od 30 do 45 min. Detekcija proteina nakon elektroforetske separacije postiže se bojenjem (s Coomassie plavilom ili srebrom) ili nekom specifičnom reakcijom (između enzima i supstrata npr.). Brzina, visoka rezolucija i reproducibilnost glavne su odlike elektroforetskih analiza proteina provedenih na PhastSystemu. Polaznici tečaja koristit će PhastSystem za brzo određivanje molekulske mase i kontrolu čistoće odabranog proteina.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kemija

POVEZANOST RADA