Naslov
Konstrukcija plazmida za optimalnu ekspresiju fuzijskog proteina YFP-Arp3 u vrsti Dictyostelium discoideum, Raper (1935)
(Plasmid construction for optimal expression of YFP-Arp3 fusion protein in Dictyostelium discoideum, Raper (1935))

Autori
Bilić, Josipa

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
11.07

Godina
2003

Stranica
63

Mentor
Weber, Igor

Ključne riječi
Arp2/3; aktin; žuti fluorescentni protein; Dictyostelium
(Arp2/3; actin; yellow fluorescent protein; Dictyostelium)

Sažetak
Polimerizacija aktina je glavni pokretač prilikom staničnog gibanja, diobe stanice, endocitoze, egzocitoze i općenito stanične dinamike. Prije nekoliko godina otkriven je proteinski kompleks Arp2/3 i ustanovilo se da on započinje sintezu aktinskih filamenata, veže se na njihov sporo rastući minus kraj otežavajući tako depolarizaciju, te povezuje filamente u ortogonalnu mrežu. U cilju detaljnijeg proučavanja tog kompleksa, konstruiran je plazmid čijom bi se ekspresijom dobio fuzijski protein YFP-Arp3 u stanicama vrste Dictyostelium discoideum. Arp3 je podjedinica kompleksa Arp2/3, a YFP je fluorescentni protein koji omogučava lokalizaciju proteina u stanici, te se može koristiti za proučavanje kolokalizacije i interakcije proteina. Međutim, ekspresija fuzijskog proteina YFP-Arp3 bila je zakočena zbog za vrstu D. discoideum, nepovoljnih kodona u DNA sekvenci YFP-a. Da bi se prevazišao taj problem, mutirana je DNA sekvenca GFP-a koja sadrži povoljne kodone za vrstu D. discoideum, u novu sekvencu čijim prepisivanja i translacijom nastaje YFP. Taj protein ima kodone prilagođene vrsti D. discoideum i uspiješno se eksprimira u njihovim stanicama, te je nazvan DYFP (Dictyostelium YFP).

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija

POVEZANOST RADA