Naslov
Izazovi razvoja optimalnih radnih uvjeta bioanalitičke kapilarnoelektroforetske tehnike za određivanje pirfenidona
(CHALLENGES OF DEVELOPING OPTIMAL ASSAY CONDITIONS IN BIOANALYTICAL CAPILLARY ELECTROPHORESIS FOR DETERMINATION OF PIRFENIDONE)

Autori
Serdar, Laura

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Farmaceutsko-biokemijski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
20.07

Godina
2020

Stranica
49

Mentor
Sertić, Miranda

Ključne riječi
pirfenidon, kapilarna elektroforeza, 5-karboksipirfenidon, salicilna kiselina, acetonitril
(Pirfenidone, capillary chromatography, 5-carboxypyrfenidone, salicylic acid, acetonitrile)

Sažetak
Idiopatska plućna fibroza je kronična bolest pluća kojoj se ne zna točan uzrok, a i patofiziologija nije u potpunosti razumljiva. Lijek pirfenidon se pokazao vrlo korisnim u terapiji bolesti IPF. On smanjuje propadanje funkcije pluća, a time i progresiju bolesti i posljedičnu smrtnost. Pirfenidon je analiziran istovremeno sa svojim glavnim metabolitom, 5-karboksipirfenidonom i unutarnjim standardom salicilnom kiselinom s ciljem uspostavljanja optimalnih radnih uvjeta na CE. Budući da se radi o neutralnoj molekuli, korištena je micelarna elektrokinetička kapilarna kromatografija koja je omogućila analizu pirfenidona, ali i 5-karboksipirfenidona te salicilne kiseline u složenom biološkom matriksu. Kako bi utvrdili vremena zadržavanja, najprije su napravljene analize na standardnim otopinama pirfenidona, 5-karboksipirfenidona i salicilnoj kiselini, pri čemu se najbolja analiza pokazala kad su standardi bili razrijeđeni u čistoj vodi. Slijedeće su se analize provodile na plazmi i serumu, pri čemu je veliki naglasak bio na predobradi uzorka zbog složenosti biološkog uzorka. Osim toga, svaki je put uz „obogaćeni“ uzorak napravljen i kontrolni uzorak da bi se utvrdila vremena zadržavanja ispitivanih analita te dostatno odijeljivanje samih pikova. Prilikom analize „obogaćenih“ uzoraka, pravi je izazov predstavljalo osiguravanje osjetljivosti s obzirom na vrlo niske koncentracije ispitivanih analita u biološkim uzorcima. U većini analiza uočena je nepravilna simetrija pika metabolita 5- karboksipirfenidona te je stoga njemu bilo posvećeno više pažnje tokom ovog diplomskog rada. Međutim, bez obzira na to, optimalni uvjeti analize postavljeni su korištenjem 20 mM boratnog pufera (pH 9, 3) uz dodatak SDS-a koncentracije 65 mM. Temperatura od 25°C bila je konstanta dok je napon bio ili 20 ili 25 kV ovisno o analizi. Odabrana valna duljina na kojoj su proučavani ispitivani analiti je 210 nm. Na kraju je kao otapalo za uzorke isproban i acetonitril, što je pokazalo zanimljive rezultate poput skraćenja vremena analize, dobru simetriju i odijeljivanje pikova. Ovim diplomskim radom utvrđeni su i ustanovljeni optimalni uvjeti odvajanja pikova analita od interesa, primjenom na biološkim uzorcima, metodom kapilarne elektroforeze.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Farmacija

POVEZANOST RADA