Naslov
Farmakokinetički parametri fitoestrogena
(Pharmacokinetic parameters of phytoestrogens)

Autori
Lasić, Kornelija

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Farmaceutsko-biokemijski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
11.12

Godina
2020

Stranica
132

Mentor
Nigović, Biljana

Ključne riječi
fitoestrogeni, izoflavoni, lipofilnost, biomimetička kromatografija, Caco-2 permeabilnost, kromatografija visoke djelotvornosti, kromatografija ultravisoke djelotvornosti, kvaliteta ugrađena u dizajn, dvodimenzionalna tekućinska kromatografija, masena spektrometrija
(phytoestrogens, isoflavones, lipophilicity, biomimetic chromatography, Caco-2 permeability, ultra-high performance liquid chromatography, quality by design, two dimensional liquid chromatography, mass spectrometry)

Sažetak
Primjena fitoestrogena se kontinuirano povećava zbog njihove biološke aktivnosti i potencijalno korisnih učinaka. Na tržištu se nalazi sve veći broj pripravaka koji sadrže različite fitoestrogene namijenjene ženama u postmenopauzi kao posebno rizičnoj skupini. Osim što se razlikuju kvantitativno s obzirom na ukupni sadržaj fitoestrogena, dodatno se razlikuju i kvalitativno s obzirom na zastupljenost pojedinih fitoestrogena. Cilj je ovog rada odrediti farmakokinetičke parametre skupini 15 strukturno sličnih fitoestrogena (genistein, biokanin A, daidzein, formononetin, genistin, sisotrin, daidzin, ononin, prunetin, 3, 4, 7-trihidroksi izoflavon, 4, 6, 7- trihidroksi izoflavon, 4, 6, 7-trimetoksi izoflavon, genistein 4, 7-dimetil eter, kumestrol, kumestrol dimetil eter) u svrhu boljeg razumijevanja njihove bioraspoloživosti i učinaka na organizam. Zatim, na temelju kromatografski određene lipofilnosti razviti novu, brzu, selektivnu i osjetljivu analitičku metodu za određivanje 8 najznačajnijih fitoestrogena iz skupine izoflavona u obliku aglikona i njihovih glikozida. Određeni su parametri koji opisuju lipofilnost skupine strukturno sličnih fitoestrogena primjenom tekućinske kromatografije ultravisoke djelotvornosti obrnutih faza (RP-UHPLC). Ispitane su njihove interakcije s fosfolipidima staničnih membrana primjenom tekućinske kromatografije visoke djelotvornosti i kolona s vezanim umjetnim membranama. Određeni su udjeli vezanja fitoestrogena za najzastupljenije proteine plazme primjenom biomimetičke kromatografije. Permeabilnost fitoestrogena i način prijenosa kroz sluznicu gastrointestinalnog trakta određeni su primjenom modela Caco-2 stanica. Dobiveni rezultati diferenciraju fitoestrogene sukladno njihovoj strukturi, gdje su aglikoni pokazali značajno višu lipofilnost, jaču interakciju s fosfolipidima, viši udio vezanja za alfa-1-kiseli glikoprotein i višu permeabilnost u usporedbi s glikozidima. Međutim, udio vezanja za humani serumski albumin bio je visok za sve ispitivane fitoestrogene. Eksperimentalno određeni farmakokinetički parametri uspoređeni su s izračunatim različitim računalnim programima. Zatim, razvijena je nova RP-UHPLC metoda primjenom QbD pristupa za istovremenu kvntifikaciju najznačajnijih fitoestrogena iz skupine izoflavona u obliku glikozida (genistin, sisotrin, daidzin, ononin) i aglikona (genistein, biokanin A, daidzein, formononetin) bez prethodno provedenog dugotrajnog postupka hidrolize. Metoda je validirana prema ICH smjernicama i primijenjena u analizi pripravaka različitih dozirnih oblika Razvijena je i dvodimenzionalna metoda tekućinske kromatografije ultravisoke djelotvornosti spregnute s masenom spektrometrijom (2D-UHPLC-MS) za pouzdanu identifikaciju fitoestrogena iz skupine izoflavona u složenom matriksu ispitivanih uzoraka. Analiza pripravaka s fitoestrogenima namijenjenim ženama u postmenopauzi novom metodom pokazala je velika odstupanja između kromatografski određenog i deklariranog sadržaja ispitivanih izoflavona.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Farmacija

POVEZANOST RADA