Naslov
Unošenje mutacija u gen SCW4 kvasca Saccharomyces cerevisiae i ispitivanje utjecaja uvedenih mutacija na vezanje Scw4 proteina u staničnu stijenku
(Introduction of mutations in the SCW4 gene of the yeast Saccharomyces cerevisiae and investigation of the influence of introduced mutations on binding of Scw4 protein in the cell wall)

Autori
Dora Hrestak

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Prehrambeno-biotehnološki fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
15.01

Godina
2021

Stranica
48

Mentor
Renata Teparić

Ključne riječi
japsinske proteaze, Kex2 proteaza, stanična stijenka, Saccharomyces cerevisiae, Scw4
(cell wall, Kex2 protease, Saccharomyces cerevisiae, Scw4, Yapsins)

Sažetak
Scw4 protein u stijenku kvasca Saccharomyces cerevisiae veže se kovalentnim i neokovalentnim vezama, međutim, točan mehanizam kovalentnog povezivanja i dalje je nepoznat. Polazišna je pretpostavka da je način vezanja sličan onome PIR proteina, s obzirom na jednak način ekstrakcije kovalentno vezane frakcije ovog proteina iz stijenke. Cilj ovog istraživanja bio je odrediti koja je aminokiselina odgovorna za kovalentno vezanje Scw4 u stijenku kvasca. U ciljanu regiju gena SCW4 uvedene su mutacije, a uzgoj mutanata proveden je u nepuferiranom mediju, te pri pH=4 i pH=7. Nakon uzgoja nekovalentno vezani proteini su izolirani iz stijenki pomoću vrućeg SDS-a, a kovaletno vezani pomoću 30 mM NaOH. Dobiveni proteinski ekstrakti analizirani su Western blot metodom. Iz dobivenih rezultata možemo zaključiti kako je za kovalentno vezanje Scw4 u stijenku S. cerevisiae odgovoran ostatak glutamina Q241.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biotehnologija

POVEZANOST RADA