Naslov
ULOGA ATG5 U PATOGENEZI EKSPERIMENTALNE TULAREMIJE
(THE ROLE OF ATG5 IN THE PATHOGENESIS OF EXPERIMENTAL TULAREMIA)

Autori
Viduka, Ina

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Medicinski fakultet

Mjesto
Rijeka

Datum
05.12

Godina
2022

Stranica
110

Mentor
Šantić, Marina

Ključne riječi
Autofagija ; Francisella ; Makrofagi ; Miševi ; Tularemija.
(Autophagy ; Francisella ; Macrophages ; Mice ; Tularemia.)

Sažetak
Cilj istraživanja: Unutarstanični patogen Francisella tularensis vrlo brzo nakon infekcije pobjegne iz fagosoma u citosol gdje se nesmetano razmnožava izbjegavajući razgradnju putem autofagije. Prijašnje su studije pokazale da Francisella izbjegava autofagiju, ali nije u potpunosti razjašnjeno koristi li ju za svoje unutarstanično razmnožavanje. Osim toga, uloga autofagije u patogenezi tularemije još uvijek nije istražena in vivo. Cilj ovog istraživanja bio je ispitati ulogu ATG5-ovisne autofagije u unutarstaničnom životu F. tularensis subsp. holarctica soj LVS koristeći in vitro i in vivo modele infekcije. Materijal i metode: Ulogu ATG5-ovisne autofagije in vitro ispitali smo praćenjem unutarstaničnog razmnožavanja i citotoksičnog učinka F. tularensis subsp. holarctica soj LVS u primarnim humanim i primarnim mišjim makrofagima te primarnim ATG5- deficijentnim mišjim makrofagima. Konfokalnom i elektronskom mikroskopijom ispitali smo interakciju bakterija s autofagičnim vakuolama. U svrhu in vivo istraživanja, uspostavili smo miševe s nedostatkom ATG5 u mijeloidnoj liniji. Nakon intradermalne infekcije ATG5-deficijentnih miševa sa sojem LVS, pratili smo preživljavanje miševa, ispitali broj bakterija i patohistološke promjene u organima inficiranih miševa te analizirali lokalizaciju bakterija u tkivima metodom elektronske mikroskopije. Rezultati: Farmakološki inhibitori autofagije i nedostatak ATG5 statistički su smanjili unutarstanično razmnožavanje i citotoksični učinak F. tularensis subsp. holarctica soja LVS u primarnim mišjim i primarnim humanim makrofagima. Rezultati konfokalne i elektronske mikroskopije potvrdili su da je ATG5 odgovoran za usmjeravanje Francisella u autofagosome 24 sata nakon infekcije ubikvitin-SQSTM1-LC3 putem. Infekcija ATG5- deficijentnih miševa sojem LVS rezultirala je povećanim preživljavanjem, značajno smanjenim razmnožavanjem bakterija u organima miševa te blažim patohistološkim promjenama u tkivu jetre, slezene i pluća. Zaključak: F. tularensis subsp. holarctica soj LVS inducira probakterijsku autofagiju te iskorištava dobivene nutrijente za svoje unutarstanično razmnožavanje u in vitro i in vivo modelu infekcije. ATG5 ima važnu ulogu u eksperimentalnoj tularemiji budući da usmjerava LVS soj u autofagične vakuole što podržava njeno unutarstanično razmnožavanje.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti, Kliničke medicinske znanosti

POVEZANOST RADA