Pregled bibliografske jedinice broj: 1258387
Važnost kvalitete DNA u Real Time PCR reakcijama
Važnost kvalitete DNA u Real Time PCR reakcijama // Zbornik sažetaka 56. hrvatski i 16. međunarodni simpozij agronoma / Rozman, Vlatka ; Antunović, Zvonko (ur.).
Osijek: Fakultet agrobiotehničkih znanosti Sveučilišta Josipa Jurja Strossmayera u Osijeku, 2021. str. 120-121 (predavanje, međunarodna recenzija, sažetak, znanstveni)
CROSBI ID: 1258387 Za ispravke kontaktirajte CROSBI podršku putem web obrasca
Naslov
Važnost kvalitete DNA u Real Time PCR reakcijama
(The importance of DNA quality for Real Time PCR
reactions)
Autori
Renata Hanzer, Ksenija Duka
Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Sažeci sa skupova, sažetak, znanstveni
Izvornik
Zbornik sažetaka 56. hrvatski i 16. međunarodni simpozij agronoma
/ Rozman, Vlatka ; Antunović, Zvonko - Osijek : Fakultet agrobiotehničkih znanosti Sveučilišta Josipa Jurja Strossmayera u Osijeku, 2021, 120-121
Skup
56. hrvatski i 16. međunarodni simpozij agronoma
Mjesto i datum
Vodice, Hrvatska, 05.09.2021. - 10.09.2021
Vrsta sudjelovanja
Predavanje
Vrsta recenzije
Međunarodna recenzija
Ključne riječi
kvaliteta, ekstrakcija DNA, Real Time PCR, inhibicija
(quality, DNA extraction, Real Time PCR, inhibition)
Sažetak
Ekstrakcija DNA i lančana reakcija polimerazom (PCR) neizostavne su metode u molekularnom laboratoriju. Lančana reakcija polimerazom u stvarnom vremenu (Real Time PCR) je metoda zasnovana na umnažanju karakterističnih odsječaka molekule genomske DNA pomoću posebno dizajniranog para nukleotidnih početnica te fluorescirajuće probe. Intenzitet fluorescencije u izravnoj je korelaciji s količinom nastalog produkta što omogućava i kvalitativno i kvantitativno određivanje mjerenjem promjene fluorescencijskog signala u stvarnom vremenu. Svakoj PCR reakciji prethodi ekstrakcija DNA. Ekstrakcija DNA podrazumijeva niz fizikalno-kemijskih postupaka s ciljem razdvajanja DNA iz uzorka od ostalih staničnih komponenti koje bi mogle imati potencijalno negativan utjecaj na uspješnost PCR reakcije. Postoji veliki broj opisanih protokola za izdvajanje DNA, no svaki od njih mora osigurati dostatne količine DNA za PCR umnažanje oslobođene od PCR inhibitora. U radu su opisana dva protokola za ekstrakciju DNA iz biljnih uzoraka. Kvaliteta i prinos metode ekstrakcije DNA mjerena je spektrofotometrijski mjerenjem odnosa apsorbanci pri različitim valnim duljinama, te vizualizacijom na gelu agaroze. Prisutnost PCR inhibitora procijenjena je RealTime PCR umnažanjem serije razrjeđenja normalizirane otopine DNA.
Izvorni jezik
Hrvatski
Znanstvena područja
Biologija, Poljoprivreda (agronomija), Biotehnologija
