Naslov
Učinak liposoma sa superoksid dismutazom na stanice izložena oksidativnom stresu
(The effect of liposomes with superoxide dismutase on the cells exposed to oxidative stress)

Autori
Galović Rengel, Ružica

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, magistarski rad

Fakultet
Farmaceutsko-biokemijski fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
13.06

Godina
2002

Stranica
71

Mentor
Barišić, Karmela ; Filipović-Grčić, Jelena

Ključne riječi
superoksid dismutaza; liposomi; mukoadhezivnost; oksidativni stres; plućne epitelne stranice
(superoxide dismutase; liposomes; mucoadhesivity; oxidative stress; lung epithelial cells)

Sažetak
Superoksid dismutaza (SOD), antioksidativni enzim i mogući protu-upalni čimbenik, uklopljena je u mukoadhezivne, kitozanom obložene liposome kako bi se produžilo njeno djelovanje i pospješio ulazak u stanicu. Pozitivno (kationski, KatL) i negativno (anionski, AnL) nabijeni te nenabijeni (neutralni, NeuL) liposomi pripravljeni su od sojinog lecitina, stearilamina, fosfatdilglicerola i kolesterola. Utjecaj lipidnog sastava liposoma i odnosa koncentracija proteina i lipida na uklapanje SOD ispitan je uporabom triju metoda za pripravu liposoma: dehidratacijsko-rehidratacijskoj, hidratacijskoj i proliposomskoj metodi. Najuspješnije uklapanje SOD, 39-65%, postignuto je pripravom liposoma proliposomskom metodom. Liposomi pripravljeni metodom hidratacije uklopili su 1-13%, a liposomi pripravljeni metodom rehidratacije-dehidratacije 2-3% SOD. Ispitivanja stabilnosti liposoma pripravljenih proliposomskom metodom nisu pokazala gubitak aktivnosti enzima tijekom 28 dana pri 4°C ili 48 sati pri 37°C. KatL, NeuL ili AnL pripravljeni proliposomskom metodom uspješno su obloženi kitozanima male i srednje molekulske mase. Oblaganje s obje vrste kitozana povećalo je mukoadhezivna svojstva kod sve tri vrste liposoma. Učinak SOD uklopljene u liposome istražen je na stanicama karcinoma pluća čovjeka, A2182. Liposomi sa SOD obloženi kitozanom jednako su djelovali na stanice A2182 kao i neobloženi liposomi glede njihove citotoksičnosti i aktivnosti SOD u stanicama. Tretiranje KatL, Neu L i AnL s 20 U/ml SOD tijekom 24 sata povećalo je aktivost SOD u stanicama. Najveće povećanje aktivnosti SOD, za 108%, postignuto je tretiranjem stanica AnL. NueL su povećali SOD u stanicama za 83%, ali nisu bili fizički stabilni ; stvarali su aglomerate i taložili se na stanice. KatL su povećali SOD u stanicama za 85%, ali su bili toksični za stanice. AnL s uklopljenom SOD uspješno su povećali (za 58%) aktivnost SOD u CHO, epitelnim stanicama ovarija kineskog hrčka, ali nisu povećali aktivnost SOD u THP-1, stanicama monocitne leukemije čovjeka. Kontrolne stanice A2182 i stanice prethodno tretirane sa SOD uklopljenom u AnL izložene su oksidativnom stresu izazvanom ksantinom(50 &#61549 ; M)/ksantin oksidazom(2, 5 ; 5 ; 10 mU/ml) tijekom 4 ili 24 sata. Oksidativni stres nije uzrokovao promjenu aktivnosti SOD u stanicama. Izlaganje netretiranih stanica ksantinu (50 &#61549 ; M)/ksantin oksidazi (5, 10 mU/ml) kroz 24 sata, izazvalo je povećanje koncentracije glutationa, osjetljivog pokazatelja staničnog odgovora na izloženost superoksidnom radikalu, a tog povećanja nije bilo u stanicama prethodno tretiranim s 20 U/ml SOD uklopljene u AnL. Omjer koncentracija reduciranog i oksidiranog glutationa nije se značajno promijenio. SOD se može vrlo uspješno uklopiti u liposome upotrebom proliposomske metode. Tako pripravljeni liposomi značajno su povećali aktivnost SOD u epitelnim stanicama. Stanice prethodno tretirane liposomima s uklopljenom SOD bile su zaštićene od štetnog utjecaja superoksidnog radikala na što je ukazala nepromijenjena koncentracija glutationa.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti, Kliničke medicinske znanosti

POVEZANOST RADA