Naslov
Ispitivanje načina vezanja mutiranog proteina Scw4 u staničnu stijenku kvasca Saccharomyces cerevisiae
(Examination of the way of binding of the mutated Scw4 protein into the cell wall of yeast Saccharomyces cerevisiae)

Autori
Matičević, Ana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, preddiplomski

Fakultet
Prehrambeno-biotehnološki fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
10.07

Godina
2020

Stranica
29

Mentor
Renata Teparić

Ključne riječi
Saccharomyces cerevisiae, Scw4, stanična stijenka
(Saccharomyces cerevisiae, Scw4, cell wall)

Sažetak
Protein Scw4 u staničnu stijenku kvasca Saccharomyces cerevisiae može se vezati nekovalentno i kovalentno, no i dalje nije poznato koji dio proteina je odgovoran za kovalentno povezivanje. U prethodnom istraživanju uvedena je mutacija u jednu od regija koja je slična Pir repetitivnim regijama za koje se pretpostavlja da bi mogle biti odgovorne za kovalentno povezivanje. Također je utvrđeno kako se nativni Scw4 u staničnoj stijenci pojavljuje u tri forme različite veličine – neprocesiranoj, procesiranoj sa Kex2 proteazom te procesiranoj sa japsinskim proteazama. U ovom radu ispitivan je način vezanja mutiranog proteina Scw4 u staničnu stijenku kvasca Saccharomyces cerevisiae pri uzgoju na pH 4 i pH 7. Prethodno izrađen konstrukt sa mutacijom umnožen je u bakteriji Escherichia coli, izoliran te su njime transformirane kvaščeve stanice. Kvasci su uzgajani u selektivnoj podlozi za uzgoj u uvjetima indukcije GAL promotora. Nakon uzgoja provedena je izolacija i analiza načina vezanja proteina stanične stijenke metodama SDS elektroforeze te metodom western blota. Na osnovu dobivenih rezultata može se zaključiti da je ispitivana regija u sekvenci Scw4 proteina bitna za njegovo kovalentno vezanje u staničnu stijenku.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biotehnologija

POVEZANOST RADA