Pregled bibliografske jedinice broj: 1210156
Kloniranje urokinaznog plazminogenskog aktivatora, njegovog inhibitora i receptora te njihova ekspresija u ljudskim stanicama u kulturi
Kloniranje urokinaznog plazminogenskog aktivatora, njegovog inhibitora i receptora te njihova ekspresija u ljudskim stanicama u kulturi, 2022., diplomski rad, diplomski, PMF, Zagreb
CROSBI ID: 1210156 Za ispravke kontaktirajte CROSBI podršku putem web obrasca
Naslov
Kloniranje urokinaznog plazminogenskog aktivatora, njegovog inhibitora i receptora te njihova ekspresija u ljudskim stanicama u kulturi
(Cloning of urokinase plasminogen activator, its inhibitor and receptor and their expression in human cells in culture)
Autori
Balent, Tihana
Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski
Fakultet
PMF
Mjesto
Zagreb
Datum
25.02
Godina
2022
Stranica
55
Mentor
Matulić, Maja
Ključne riječi
urokinaza, PAI-1, uPAR, tumorske stanice, ekspresija, aktivnost
(urokinase, PAI-1, uPAR, tumor cells, expression, activity)
Sažetak
Urokinazni plazminogenski aktivator (uPA) ili urokinaza zaslužan je za aktivaciju plazminogena i njegovu pretvorbu u plazmin, proteolitički enzim koji razgrađuje ekstracelularni matriks. Urokinaza je dio sustava koji obuhvaća i receptor uPA (uPAR) koji je veže na staničnu membranu te njene inhibitore, PAI-1 i PAI-2. Cilj ovog rada bio je klonirati sekvence koje kodiraju za urokinazu, njen receptor i inhibitor PAI-1 te ih eksprimirati u različitim staničnim linijama. Analiza ekstracelularne enzimske aktivnosti i ekspresije pojedinih elemenata sustava u različitim tipovima stanica ukazala bi na mehanizme regulacije urokinazne aktivnosti. Konstruirani su plazmidi sa sekvencama gena za uPA, PAI-1 i uPAR te transficirane stanične linije A1235, HeLa i HEK293. Stanice HEK293 i A1235 transficirane plazmidom sa sekvencom za uPA imale su bazalnu aktivnost urokinaze. Sojevi stanica A1235 i HEK293 transficirani plazmidom sa sekvencom za PAI-1, pokazali su smanjenu aktivnost urokinaze. Stanice HeLa nisu pokazale urokinaznu aktivnost. Unos plazmida sa sekvencom uPAR nije utjecao na urokinaznu aktivnost stanica. Analiza ekspresije proteina pokazala je da plazmidi sa sekvencom urokinaze nisu promijenili razinu ekspresije ovog proteina u staničnim lizatima. Kod stanica A1235 i HEK293 detektirano je povećanje ekspresije uPAR i PAI-1 nakon transfekcije plazmidima s njihovim sekvencama. Uzgojene stanične linije s različitom urokinaznom aktivnosti mogu poslužiti kao model za istraživanje utjecaja urokinaznog sustava na staničnu proliferaciju, migraciju i preživljenje.
Izvorni jezik
Hrvatski
Znanstvena područja
Biologija
